发布时间:2019-04-07 15:08 原文链接: 检测凋亡和其他形式的细胞死亡

实验步骤

基本方案1 用活细胞或荧光染料定量细胞活性

显微镜观察是一种简单且准确的检测凋亡的方法。凋亡的标志性特征包括细胞核浓
缩 、细胞膜完整但出现发泡现象,以及清晰的胞质。

材 料 (带7 项 目 见 附 录 1)

V 染料混合剂

P B S 的 细 胞 悬 液 (附 录 1)

9 6 孔圆底板

显微镜用的载玻片

1 号厚度的盖玻片或预先包被了聚左旋赖氨酸的盖玻片(用于非贴壁细胞, Sigma)

装 有 4 0 倍 或 6 3 倍的物镜和适当滤光片的荧光显微镜(表 2. 14. 1)

基 本 方 案 2 DNA裂解片段的定量

该方法用于研究细胞毒性T 细 胞 (C T L ,单 元 2. 1 0 ) 和 自 然 杀 伤 细 胞 (N K 细胞,
单 元 8. 6 ) 介导的凋亡的检测。

材 料




备 选 方 案 计 数 放 射 性 标 记 的 DNA定 量 细 胞 中DNA 片段

附 加 材 料




辅 助 方 案 1 用125I UdR和51C r放射性标记细胞核

材 料

细胞悬液
V R P M I -10完全培养基
水溶性 lmCi/ml 碘 苷 (125I U d R ) (约 2000 Ci/m m o l ; ICNBiomedicals)

辅 助 方 案 2 用3H TdR 放射性标记细胞核

材 料