1.诊断标准
目前，国际上常采用Lennard-Jones标准，国内采用1993年太原全国慢性非感染性肠道疾病学术研讨会制定的《溃疡性结肠炎的诊断标准及疗效标准》，两者均强调排除性诊断，内镜及组织学特征。
（1）Lennard-Jones标准 有溃疡性结肠炎临床表现者，符合下列标准则提示本病的诊断。①首先必须排除下列疾病 感染性结肠炎、缺血性结肠炎、放射性结肠炎、孤立性结肠溃疡、克罗恩病；②必须包括下列条件 活组织检查显示弥漫性的黏膜炎症，无肉芽肿形成；内镜或钡剂灌肠检查发现，炎症累及直肠和部分或全结肠，病变从直肠开始，连续不断地由远端向近端逆行发展。
（2）全国慢性非感染性肠道疾病学术研讨会标准 ①临床表现 不仅有持续性或反复发作的黏液血便，腹痛，伴有不同程度的全身症状，而且不应忽视少数只有便秘而无血便的患者，既往史及体检中要注意关节，眼，口腔，肝脾等肠外表现。②结肠镜检查 黏膜有多发性浅溃疡，伴充血，水肿，病变大多从直肠开始，且呈弥漫性分布；黏膜粗糙呈细颗粒状，黏膜血管模糊，质脆易出血，或附有脓性分泌物；可见假性息肉，结肠袋往往变钝或消失。③黏膜活检 组织学检查呈炎症性反应，同时常可见糜烂，溃疡，隐窝脓肿，腺体排列异常，杯状细胞减少及上皮变化。④钡剂灌肠检查 黏膜粗乱及（或）有细颗粒变化；多发性浅龛影或小的充盈缺损；肠管缩短，结肠袋消失可呈管状。⑤手术切除或病理解剖 可见肉眼或组织学的溃疡性结肠炎特点。
（3）排除相关疾病后诊断 在排除细菌性痢疾，阿米巴痢疾，慢性血吸虫病，肠结核等感染性结肠炎及克罗恩病，缺血性结肠炎，放射性结肠炎的基础上，可按下列标准诊断：①根据临床表现，结肠镜检查中之一项和（或）黏膜活检可以诊断本病。②根据临床表现及钡剂灌肠之一项可以诊断本病。③临床表现不典型而有典型的结肠镜检查表现或钡剂灌肠检查典型改变者，可以诊断本病。④临床表现有典型症状或典型既往史，而目前结肠镜或钡剂灌肠检查并无典型改变者，应列为“疑诊”随访。
2.主要临床特点
最常见的症状为反复发作性结肠炎，急性发作时表现为血性腹泻，发热，腹痛，患儿表现有面色苍白，贫血，营养不良，青春发育延迟，临床上溃疡性结肠炎应与细菌性痢疾，阿米巴肠炎，肠结核，局限性结肠炎（Crohns病），结肠肿瘤相鉴别。
3.主要辅助检查
钡灌肠及电子结肠镜检是有价值的诊断及鉴别诊断方法。