正常细胞常规核型的标本制备_肿瘤细胞染色体标本制备

利用肿瘤细胞无限繁殖的特点，掌握其体外生长动态，取处于对数生长期的细胞便可获得丰富的分裂相。肿瘤细胞染色体异常包括两个方面：1.  结构异常  即在肿瘤细胞常出现的染色体畸变，包括双着丝点染色体、环状染色体、断裂的染色体、染色体裂隙及微小体等。2.  数目异常  由于肿瘤细胞分裂失去应有的调控，可出现亚二倍体、超二倍体和多一倍体数目异常现象。肿瘤细胞染色体制备技术在细胞生物学、医学遗传学的基础研究和临床诊断、愈后观察等方面均有广泛用途。

HL—60细胞HeLa细胞

640培养液肝素溶液秋水仙素胰蛋白酶EDTAPHAKCl甲醇冰醋酸Giemsa原液磷酸缓冲液生理盐水

超净台镊子离心机水浴箱天平离心管显微镜载玻片平皿

1.  以1.6x 10⁵个/ml 细胞浓度将FL-60细胞接种于培养瓶内。

2.  48小时后以终浓度为0.04ug/ml 的秋水仙素处理2.5小时，移入10 ml 离心管。

3.  其余步骤与淋巴细胞染色体制备相同。

4.  将长成单层的HeLa细胞按1：2传代进行培养，36小时后用终浓度为0.04 ug/ml 的秋水仙素处理3小时。

5.  按时终止培养，用0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA混合消化液处理单层细胞，待细胞收缩变圆时，弃去消化液。

6.  加入少许低渗液将细胞从瓶壁洗脱，移入10 ml 离心管，加入预热37℃的低渗液至5~6 ml，在37℃处理25分钟。

7.  以下步骤同淋巴细胞染色体核型制备。

8.  结果：计数HeLa细胞和HL-60细胞的染色体数并寻找是否有畸变的染色体。