枸橼酸钠对照品溶液的制备
取经减压干燥至恒重的枸橼酸钠(C6H5Na3O7·2H2O)0.6g,精密称定,置100ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取5ml,置50ml量瓶中,用5%三氯乙酸稀释至刻度,摇匀,即得。
供试品溶液的制备
精密量取供试品0.5ml与水4.5ml,加10%三氯乙酸溶液5ml,混匀,置60℃水浴加热5分钟,以每分钟4000转离心20分钟,取上清液备用。
测定法
精密量取供试品溶液1ml,置25ml具塞试管中,精密加吡啶1.3ml,混匀,再精密加醋酸酐5.7ml,立即混匀并置31℃±1℃的水浴中,准确放置35分钟后,照紫外-可见分光光度法(通则0401),在波长425nm处测定吸光度。另精密量取枸橼酸钠对照品溶液0.25ml、0.50ml、0.75ml、1.0ml,分别置于具塞试管中,各精密加5%三氯乙酸溶液0.75ml、0.50ml、0.25ml、0.00ml(其相对应的枸橼酸离子含量为0.5mmol/L、1.0mmol/L、1.5mmol/L、2.0mmol/L),自本段前述“精密加吡啶1.3ml”起,同法操作。
以对照品溶液枸橼酸离子浓度对其相应的吸光度作直线回归,求得直线回归方程。计算出供试品溶液中的枸橼酸离子含量(mmol/L),再乘以供试品稀释倍数(20),即为供试品枸橼酸离子含量(mmol/L)。