1 范围
本方法适用于十字花科植物含油种子中不同硫甙含量的测定。
2 原理
用甲醇抽提出硫甙,然后在离子交换树脂上提纯和进行酶脱硫。然后用带梯度洗脱装置和紫
外检测的反相高效液体色谱(HPLC)进行测定。
3 试剂
所用试剂,除非另外说明,均需分析纯。水符合 ISO3696 标准的 2 级。
3.1 甲醇;
3.2 乙酸钠溶液;
3.3 咪唑甲酸酯溶液内标(黑芥子硫苷酸钾单水合物或金莲葡糖硫苷);
3.4 流动相;
3.5 离子交换树脂;
3.6 硫酸酯酶。
4 仪器设备
4.1 高效液体色谱;
4.2 HPLC 用色谱柱双光束光谱仪;
4.3 微型磨;
4.4 聚丙烯管;
4.5 巴斯德移液管。
5 操作步骤
5.1 采样
取样见 ISO 5500。
5.2 样品制备
按 ISO5502 缩减试样以得到要求的量,必要时可磨粉。
5.3 硫甙提取
称 100mg 试样,精确至 0.1mg。试样经抽提、离子交换、提纯和脱硫,得到硫甙。
5.4 测定
用高效液相色谱测定,需做空白试验。
6 精确度
重复性:
同一分析者在相同实验室按相同方法对同一试样连续分析两次,
绝对偏差不超过 10%。
再现性:不同实验室、不同分析者用不同设备得到的结果,两次绝对偏差不超过 20%。