发布时间:2019-05-07 09:36 原文链接: 油料残渣-硫甙的测定-高效液相色谱法


1  范围

本方法适用于十字花科植物含油种子中不同硫甙含量的测定。

2  原理

用甲醇抽提出硫甙,然后在离子交换树脂上提纯和进行酶脱硫。然后用带梯度洗脱装置和紫

外检测的反相高效液体色谱(HPLC)进行测定。

3  试剂

所用试剂,除非另外说明,均需分析纯。水符合 ISO3696 标准的 2 级。

3.1  甲醇;

3.2  乙酸钠溶液;

3.3  咪唑甲酸酯溶液内标(黑芥子硫苷酸钾单水合物或金莲葡糖硫苷);

3.4  流动相;

3.5  离子交换树脂;

3.6  硫酸酯酶。

4  仪器设备

4.1  高效液体色谱;

4.2  HPLC 用色谱柱双光束光谱仪;

4.3  微型磨;

4.4  聚丙烯管;

4.5  巴斯德移液管。

5  操作步骤

5.1  采样

取样见 ISO 5500。

5.2  样品制备

按 ISO5502 缩减试样以得到要求的量,必要时可磨粉。

5.3  硫甙提取

称 100mg 试样,精确至 0.1mg。试样经抽提、离子交换、提纯和脱硫,得到硫甙。

5.4  测定

用高效液相色谱测定,需做空白试验。

6  精确度

重复性:

同一分析者在相同实验室按相同方法对同一试样连续分析两次,

绝对偏差不超过 10%。

再现性:不同实验室、不同分析者用不同设备得到的结果,两次绝对偏差不超过 20%。