流式细胞仪分选细胞的基本原理是基于细胞的物理和化学特性对细胞进行逐个分析和分选。
当细胞悬液被制成单细胞流,使其依次通过流式细胞仪的检测区域时,会受到以下几种信号的检测:
散射光信号:包括前向散射光(FSC)和侧向散射光(SSC)。FSC 与细胞的大小有关,细胞越大,FSC 信号越强;SSC 与细胞的内部复杂程度(如颗粒度、核质比等)相关。
荧光信号:如果细胞经过特异性荧光染料或荧光标记抗体的染色,在特定波长的激光激发下会发出荧光。不同的细胞所带的荧光标记不同,发出的荧光强度和波长也不同。
流式细胞仪通过检测这些信号,并将其转换为电信号,再经过计算机分析处理,得到每个细胞的各种参数。根据预先设定的分选条件,仪器通过液滴充电技术使含有目标细胞的液滴带上特定的电荷,然后在电场的作用下,这些带电液滴发生偏转,进入不同的收集容器中,从而实现细胞的分选。
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