发布时间:2022-02-21 15:32 原文链接: 流式细胞检测

技术原理
       流式细胞技术(flow cytometry,FCM)是利用流式细胞仪进行的一种单细胞定量分析和分选技术。是一种在液体系统中,测定单个细胞或细胞器的生物、物理和化学特性,并根据这些特性将所需要的细胞或细胞器进行定量分析和分选的技术。它是一种可以检测细胞或者生物学颗粒的多种特性的技术,用来了解细胞群的均值和分布情况,并还可以分选感兴趣的细胞、对该细胞做进一步的培养研究。工作原理是在细胞分子水平上通过单克隆抗体对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析。它可以高速分析上万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数,具有速度快、精度高、准确性好的优点。

仪器平台

  • 分析型流式细胞仪(BD FACS Calibur):只检测不再培养,细胞样本分析后进入废液桶,不能回收利用

平台BD FACS Calibur重要仪器参数:
主机系统:含15mw 488nm氩离子蓝色激光器,635nm红色激光器,4个荧光探测器和2个散射光探测器;
滤光片:488nm激光的荧光通道包括530/30nm、585/42nm、670nm LP;635nm激光的荧光通道:661nmLP;
可选用荧光: FITC,PE,PerCP,PI,PE-Cy5,PerCP-Cy5.5,PE-Cy,APC,Rhodamine,Cyanine等

  • 分选型流式细胞仪(BD FACS AriaII):检测后培养既能流式分析,还能对分析的目的细胞进行分选。

平台BD FACS Aria II Cell Sorting System重要仪器参数:
主机系统:配置375nm、488nm、640nm三种不同波长的激光器,单细胞分选模块,可做单细胞分选,9个荧光探测器和2个散射光探测器;
可选用荧光::可同时检测9种荧光标记细胞,DAPI、BV510、FITC、PerCP、PE、PE-CY7、PE-CF594、APC、APC-CY7。

http://gxbyjsky.nyfy.com.cn/__local/B/62/2C/18E558A9803CBBF1F41A6C34AD0_C3186B51_806F0.jpg


      平台拥有或能够协调BD FACS Calibur™流式细胞仪分析仪2台,BD FACS Aria II Cell Sorting System (3 Lasers)流式细胞分选仪2台,BD FACS melody流式细胞分选仪1台,BD FACS Verse流式细胞分析仪1台,Image StreamX Mark II 量化成像流式细胞分析仪1台,能够承接从动物建模(或细胞培养及建模)、抗体配色、样本前处理(如血液样品处理)、上机检测到数据分析的一站式流式检测服务。 通过专业权威的实验服务、丰富全面的数据信息、标准化高质量的资源交流,覆盖生物医学领域的万千用户。
技术应用

  • 细胞结构:细胞大小;细胞颗粒度;细胞表面积;核浆比例;DNA含量与细胞周期;蛋白质含量

  • 细胞功能:细胞表面/胞浆/核的特异性抗原;细胞活性;细胞内外的细胞因子;激素结合位点;细胞受体;蛋白磷酸化;pH值;钙离子浓度;细胞膜电位/线粒体膜电位


服务内容

实验检测项目分类检测试剂/试剂盒
1.流式细胞术FACS-分子Marker标记及分析
PBMC流式分选特定亚型细胞/单细胞标记特定通道流式抗体CD分子Marker
细胞表面抗原检测T细胞、B细胞、NK细胞、DC细胞等、Macrophage M1/M2等
细胞胞内抗原检测Th1/Th2/Th17检测或者其他特定细胞的细胞因子检测(白细胞介素ILs(IL2、IL6、IL12、IL17等,TNFα、IL1-β、IFNs(干扰素家族因子α,β,γ))
细胞核内抗原检测调节性T细胞(treq)
淋巴细胞免疫分型淋巴细胞亚群分析(T/B/NK )、辅助性T细胞、抑制性T细胞、调节性T细胞(treq)、T淋巴细胞活化检测,细胞表面标记物检测,Th1/Th2/Th17等
T细胞亚群检测CD3+,CD4+,CD8+细胞
辅助性T细胞亚群检测主要包括Th1/Th2/Th17
巨噬细胞分型检测M1/M2
核内因子检测Treg、Tfh、Tfr
血小板相关抗体分析CD62等
干细胞鉴定/检测ABCG2、Oct-4、 SSEAs、 CD34、CD133、Sca-1、 c-kit等
原代细胞鉴定细胞表面或胞内Marker
PNH相关抗原检测CD55/CD59
MDSCs分型检测小鼠:CD11B+Gr1-,两个亚型:粒细胞样:CD11B+Ly6C-Ly6G+;单核细胞样:CD11B+Ly6C+Ly6G-;
MDSCs分型检测人源:CD11B+CD14-CD33+
单核细胞检测
DC细胞检测
粒细胞检测
原代细胞体外诱导分化原代细胞及其诱导细胞表面标记物流式检测
单细胞分选,或者带荧光的目的细胞细胞磁珠分选/FCS流式分选
2.流式细胞术FACS-功能表型检测
细胞凋亡检测Annexin V-FITC/PI、Annexin V PE/7-AAD、Annexin V-APC/PI、Heochst 33342/PI等
细胞周期检测流式分析G0/G1期、S期、G2期和M期
细胞增殖检测CFSE、BrDU、 EDU
细胞活性检测钙黄绿素 AM 
线粒体膜电位检测JC-1、JC-10、TMRE
活性氧检测ROS等2′,7′-二氢二氯荧光黄双乙酸钠(DCFH-DA)捕获剂
细胞毒性检测DRAQ7™ 和 7-AAD、碘化丙啶、胺反应性染料
可溶性蛋白质分子检测血清/细胞上清中的Th细胞因子、炎性因子和抗病毒因子
钙流检测Fluo-3/4等
流式多种细胞因子检测<