发布时间:2020-07-14 09:58 原文链接: 流感疫苗生产的纯化过程和设备

流感疫苗生产的纯化过程:

1.       已培养好的带病毒的鸡胚用75%酒精消毒;

2.       收集鸡胚尿囊液:根据鸡蛋大小收集量略有不同(每只6-10ml);

3.       尿囊液初滤JST型10μm滤芯过滤;

4.       连续流离心机或超滤系统过滤

a.  连续流离心机:日立R13C,用12,000rpm,流量:每分钟600-800ml,除去杂质,上清液用于透析浓缩;

b.  Millipore超滤系统,0.45μm滤膜,除去杂质

5.       尿囊液的透析浓缩:用Millipore超滤器,1000KD膜包浓缩,浓缩后通常为尿囊液量的1/30;

6.       超速离心的病毒纯化(略);

7.       福尔马林脱毒;

8.       乙醚裂解;

9.       100KD透析脱糖;

10.   去福尔马林;

11.   去乙醚……

12.   几种流行病毒抗原的混合(如H1N1+H3N2+H2N2)和稀释

13.   加入稳定剂

14.   成品

 

离心纯化需要准备的仪器和基本材料:

1.       仪器

a.  阿贝折射仪 Abbe  refractometer (测蔗糖浓度)

b.  Cole parmer 软管泵:KH-77913-25

c.  紫外分光光度计或核酸蛋白分析仪(有280nm,260nm波长的),可以是带流动池及记  录仪,也可以是带标准样品池的)

2.       梯度液

a.        PB缓冲液PH7.3

b.       30% w/w蔗糖液(Sucrose,Sigma,AR级)

c.        55% w/w蔗糖液

d.       58% w/w蔗糖液

3.       实验器具

a.        50ml有刻度玻璃管    100支

b.       500ml有刻度烧杯     5支

c.        100ml有刻度烧杯     5支

d.       1000ml有刻度量筒    3只


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