浅析单细胞分离的主要应用和特点

单细胞分离是一种从待分离的材料中直接分离单个细胞进行培养获得纯培养的方法，该法在显微镜下操作，对于体积较大的微生物，可以用毛细管提取微生物个体；对较小的细胞或孢子，可以用显微针、钩、环等挑取以获得单细胞；也可将适当稀释后的样品制成小液滴，在显微镜下选取只含有一个细胞的液滴培养。

　　单细胞分离快速高效接种单个活细胞至微孔板，主要功能为高效柔和地分离或分选活的单细胞，该系统通过微流控技术柔和地形成细胞液滴，同时利用白光和荧光成像实时分析细胞数量和荧光强度，将符合要求的单细胞液滴准确接种至96孔板或384孔板等微孔板中。

    整合分离过程中避免液体剪切力、电压、超声等影响，以维持高细胞存活率，减少对细胞的胁迫压力，便于后续培养或分析，主要应用包括细胞株开发、稀有细胞分离、单细胞基因组测序和单细胞RNA测序等。

　　高通量单细胞分离系统：白光系统，根据细胞直径、圆度的形态指标筛选特定细胞；白光+荧光系统，根据细胞直径、圆度以及荧光强度筛选特定细胞。

　　主要特点：

　　1、分离效率>85%，单细胞活率>75%；

　　2、记录分离前后的连续5张图像，用于支持细胞株的单克隆性；

　　3、采用一次性分离槽，省却系统的清洗验证，交叉污染的风险；

　　4、采用白光成像和荧光成像，可根据细胞直径、圆度以及荧光强度筛选出感兴趣的细胞；

　　5、内置除静电装置，消除微孔板静电，确保细胞液滴接种至微孔正中间，尤其是PCR板。