浅谈原代细胞的培育办法

一：安排块培育法

（1）依照前述办法取材，将安排剪成或切成1mm3巨细的小块，并参加少许培育基使安排湿润。

（2）将小块均匀涂布于瓶壁，每小块距离0.2 cm~0.5cm，一般在25mL培育瓶（底面积为17.5cm2）可接种20～30小块为宜,小块放置后,轻轻翻转培育瓶,使瓶底朝上,然后于瓶内参加适量培育基盖好瓶塞,将瓶歪斜放置在37℃温箱内。

（3）培育2~4小时，待小块贴附后，将培育瓶缓慢翻转平放，静置培育，动作要轻，严禁摇摆和来回振动，以防因为激动而使小块漂起而造成培育失败，若安排块不易贴壁可预先在瓶壁涂一薄层血清、胎汁或鼠尾胶原等。

二：消化培育法

该办法是选用前述的消化涣散法，将阻碍细胞成长的细胞间质（包含基质、纤维等）去除，使细胞涣散形成细胞悬液，然后分瓶培育。

三：悬浮细胞培育法

关于悬浮成长的细胞，如白血病细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和细胞无需消化，可选用低速离心分离，直接培育，或经细胞分层液分离后接种培育。