浅谈大鼠海马神经元细胞的分离培养方法

大鼠海马神经元细胞分离自海马体，海马体，又名海马回、海马区、大脑海马，海马体主要负责记忆和学习。海马神经元细胞是海马区的主要细胞组成，主要功能是参与近期记忆、情绪及内脏功能调节、是老年性痴呆、癫痫等疾病的主要病灶之一。

　　海马属于大脑的边缘系统，在学习、记忆、情绪反应及神经系统疾病的病理生理变化等方面有重要作用，而且海马组织是神经系统内主要的神经干细胞聚集区，具有高度序化板层结构和神经元相对独立分布的特点，境界相对清晰，便于取材，因此，海马神经元体外培养模型被广大基础医学和临床医学研究者当做理想的实验模型。

　　大鼠海马神经元细胞的组织来源于实验小鼠的正常脑组织，因为该细胞类似于干细胞属于高分度分化的细胞特性，具有不能传代，不能增殖等特点，所有收到细胞后尽快使用。

　　海马神经元细胞的分离培养方法：

　　1、取1-10d的新生小鼠。用75%的乙醇浸泡；

　　2、在冰浴的PBS中分离海马，PBS洗涤3次，剪碎；

　　3、用0.25%Trypsin+0.1%Ⅰ型胶原酶37℃水浴振荡消化30min；

　　4、用FBS终止消化，轻轻吹打；

　　5、过100μm滤网；

　　6、收集滤液，300g离心5min；

　　7、用完全培养基重悬沉淀，铺瓶。

　　大鼠海马神经元细胞培养是研究神经细胞生物学特性和外源干扰因素作用（细胞因子）的有效细胞模型，其在神经生物学，发育生物学体外实验研究中已被广泛应用。