(一)保留时间变化
1.柱温变化柱恒温,必要时需配置恒温箱
2.等度与梯度间未能充分平衡至少用10倍柱体积的流动相平衡柱
3.缓冲液容量不够用》25mmol/L的缓冲液
4.柱污染每天冲洗柱
5.柱内条件变化稳定进样条件,调节流动相
6.柱快达到寿命采用保护柱
(二)保留时间缩短
1.流速增加检查泵,重新设定流速
2.样品超载降低样品量
3.键合相流失流动相pH值保持在3~7.5,检查柱的方向
4.流动相组成变化防止流动相蒸发或沉淀
5.温度增加柱恒温
(三)保留时间延长
1.流速下降管路泄漏,更换泵密封圈,排除泵内气泡
2.硅胶柱上活性点变化用流动相改性剂,如加三乙胺,或采用碱质钝化柱
3.键合相流失同前(二)3
4.流动相组成变化同前(二)4
5.温度降低同前(二)5
(四)出现肩峰或分叉
1.样品体积过大用流动相配样,总的样品体积小于*峰的15%
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