液相色谱仪检测豆制品中大豆异黄酮的方案

液相色谱仪测定大豆产品中大豆异黄酮的含量

大豆异黄酮是大豆生长过程中形成的次生代谢产物。大豆异黄酮是从植物中提取的，具有与雌激素相似的结构，当大豆异黄酮影响激素分泌、代谢生物活性、蛋白质合成和生长因子活性时，大豆异黄酮是天然的癌症化学预防剂。平时多吃大豆异黄酮有助于抑制前列腺癌细胞的生长。饮食中的大豆异黄酮主要来源于大豆和大豆制品。采用高效液相色谱仪(HPLC)测定了大豆异黄酮的含量。建立了高效液相色谱仪测定大豆异黄酮的方法。

样品制备：

10 g大豆样品称重，用10倍80%乙醇回流1小时，然后超声提取30分钟。上清液用定性滤纸过滤，滤液移入100毫升容量瓶中，用0.32um滤膜的溶剂过滤器过滤。从10ml和离心管中准确提取液样，用水浴氮气风机在50℃浓缩结晶，溶于5ml乙腈-0.2%乙酸溶液中。过滤0.32um膜，移入样品瓶进行高效液相色谱仪分析。

检测仪器：

超高液相色谱仪(紫外检测器，四元数泵，手动采样器)，氮气

试剂：甲醇、乙腈（色谱纯度）；水：蒸水；以乙醇为分析纯度的样品制备；大豆异黄酮标准品：大豆苷、大豆苷、染料木素、大豆苷、大豆苷、染料木素。

色谱条件：

色谱柱为C18柱(150mm、6mm、5μm),流动相为乙腈溶液和醋酸溶液,流速为0.15mL·min,柱温为200℃,进样体积为5/L·L~(-1)。

采用溶剂过滤器制备样品，保证了样品的纯度，有效地防止了杂质对检测结果的影响。采用水浴式氮气风机将空气与样品溶剂分离，高温加热结晶，更适合于标准样品溶液的配制。采用液相色谱仪测定大豆制品中异黄酮的含量，重现性好，精密度高，回收率高。