在高效液相色谱仪分析和检测过程中,对高效液相色谱仪的温度设置和控制要求较高。色谱柱和探测器都要求精确控制工作环境温度。一般来说,柱的恒温精度在±0.1和0.5°c之间,探测器的恒温要求较高。
在色谱分析系统中,温度对溶剂的溶解度、色谱柱的性能和流动相的粘度有一定的影响。通常,温度的升高会增加溶质在流动相中的溶解度,从而降低其分配系数,但对分离选择性几乎没有影响;它还降低了流动相的粘度,从而改善了传质过程并降低了色谱柱。压力。另外,温度太高而不能在流动相中产生气泡,这可能干扰检测结果。
高效液相色谱柱的温度主要由柱温箱控制。不同的工作温度对保留时间和相对保留时间有影响。柱温升高可以加快分离过程,但样品保留时间的不稳定性会增加检测的麻烦,降低分辨率。相反,当柱温较低时,分辨率会增加,但分离过程时间会增加,因为在低温下,流动相粘度的增加会延长检测时间,增加泵的磨损,同时溶解性的相对降低会导致缓冲。盐结晶堵塞泵、注射阀、管道和液相色谱柱的现象,杂质吸附在填料上,难以洗脱,影响色谱柱的使用寿命。
不同的检测器对温度具有不同的灵敏度。紫外线探测器一般会在温度波动超过±0.5°c时造成基线漂移波动。差分折射探测器的灵敏度和最小探测能力往往取决于温度控制的精度。因此,有必要将其控制在(+0.001[C]范围内,微吸附热探测器也应控制在(+0.001[C]范围内。
通常,在液相色谱仪分析中,柱温对分离的影响不显着,实验通常在室温下进行。在高效液相色谱仪中,有时在流动相中加入极性物质如缓冲液以调节其分配系数,温度对保留值有很大影响。
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