液相色谱仪系统的磷酸清洗和硝酸钝化

磷酸清洗通常用于从液相色谱仪系统中除去有机杂质。由于洗涤作用，磷酸清洗比强有机溶剂清洗更好更快。磷酸清洗必须在硝酸钝化前完成。

硝酸钝化实际上是在不锈钢表面上生成均匀的氧化层。这层氧化膜保护不锈钢免受腐蚀，并且尽量减少浸出的金属离子进入流动相。

一、使用前需要做磷酸清洗和硝酸钝化的应用：

1、所有的氨基酸分析系统。

2、所有包含电化学检测器的系统。

3、所有分析无机阳离子和过渡金属的系统。

4、所有柱后添加衍生试剂和络合样品组分的系统。

二、使用前只需做磷酸清洗的应用：

1、所有常规用途、在低pH值环境下和在低紫外检测波长下运行的系统。

2、所有高灵敏度的梯度紫外检测系统。

三、磷酸清洗和硝酸钝化步骤：

在实行这个程序时，要采用适当的安全防护措施。

首先，拆下色谱柱，然后用两通或接头取代色谱柱。通过软件取消紫外检测器的自动回零功能。

1、用甲醇彻底冲洗系统，以等比例方式通过泵的所有管路。

2、用水彻底冲洗系统，以等比例方式通过泵的所有管路。

3、以等比例方式通过泵的所有管路导入30%（v/v）磷酸水溶液，以1mL/min流速冲洗约1h。在冲洗期间反复活动所有阀，包括参比阀、进样阀和旁路阀等。

4、用水彻底冲洗所有管路和系统，必要时用6N硝酸重复以上步骤。否则，跳到第7步。注意硝酸是强紫外吸收溶液。除非需要，不要做钝化程序。

5、以等比例方式通过泵的所有管路导人6N硝酸水溶液，以1mL/min流速冲洗约1h。

6、用水彻底冲洗系统，仔细检查是否有渗漏，在冲洗期间反复活动所有阀，包括参比阀、进样阀和旁路阀等。

如果用低于270nm紫外波长检测，需要用更大量的水冲洗，不断换新鲜水并活动各个阀，以便从系统中除去所有痕量硝酸根离子。硝酸清洗后，经常在几天内会观察到在低紫外波长下有负的基线漂移。经常换水是尽快消除紫外本底的关键。

7、返回到甲醇冲洗，然后继续用实验所用溶剂冲洗。

8、通过软件使紫外检测器的自动回零功能恢复。