液相色谱仪紫外可见吸收检测器简介

液相色谱仪紫外可见吸收检测器（UVD）属于选择性检测器，是液相色谱中应用最广泛的检测器。液相色谱中约75%的检测器是UVD（其中50%是多波长，25%是PDAD）。

一、结构与原理：

液相色谱流通池内样品的浓度与吸光度的关系遵循Beer定律：

        A = ㏒（I₀/I）=εbc

式中：A为吸光度，I₀为入射光强度，I为透射光强度，ε为样品的摩尔吸光度，b为流通池的光程长度，c为样品浓度。

UVD常用氘灯作光源，装有一个光栅型单色器，有两个流通池，一个是参比池，另一个是测量池。

氘灯发射出紫外－可见区范围的连续波长的光，波长选择范围为190～800nm。光线照射到全息凹面光栅上，衍射的单色光照射到半透射反光镜上被分成两束，一束经测量池后照射到测量光电池上，另一束经参比池后照射到参比光电池上。若两个流通池都通过纯的均匀溶剂，则它们在紫外光下几乎无吸收，两个光电池上接收到的辐射强度相等，即无信号输出。当组分进入测量池时，吸收一定的紫外光，使两个光电池接收到的辐射强度不等，即有信号输出，输出信号大小与组分浓度成正比。

二、特点：

1、波长可选。

2、灵敏度高。

3、噪声低，线性范围宽。

4、对流动相的温度和流速变化不敏感。

5、适用于梯度洗脱，可用于制备。

6、能与多种检测器串联使用。

三、不足：

1、对紫外吸收差的化合物（如不含不饱和键的烃类等）灵敏度很低。

2、流动相的选择受到一定限制。

（1）紫外吸收大的溶剂不能做流动相。

每种溶剂都有截止波长，当小于该截止波长的紫外光通过溶剂时，溶剂的透光率降至10%以下，因此，流动相的截止波长不能大于UVD的工作波长。用截止波长以上至少5～10nm作为工作波长。

（2）缓冲盐、离子对试剂和胺改性剂也会有影响。

四、应用：

对大部分有机物有响应。