液相色谱仪紫外检测器工作原理、应用及注意事项

 液相色谱仪紫外检测器是应用zui广泛的一种检测器，当检测波长范围包括可见光时，又称为紫外-可见光检测器。紫外检测器不仅灵敏度高、噪音低、线性范围宽、有较好的选择性，而且对环境温度、流动相组成变化和流速波动不太敏感，因此可用于对光吸收小、消光系数低的物质进行微量分析。既可用于等度洗脱，也可用于梯度洗脱。由于紫外检测器对流速和温度均不敏感，又可用于制备液相色谱仪。但在使用液相色谱仪紫外检测器时，要注意流动相中各种溶剂的紫外吸收截止波长，如果溶剂中含有吸光杂质，则会提高背景噪音，降低灵敏度。大部分常见有机物质和部分无机物质都具有紫外或可见光吸收基团，因而有较强的紫外或可见光吸收能力，因此UVD既有较高的灵敏度，也有很广泛的应用范围，是液相色谱中应用zui广泛的检测器。 

    液相色谱仪紫外检测器的工作原理是：当一束单色光透过流动池时，若流动相不吸收光，则吸收度A与吸光组分的浓度C和流动池的光径长度L成正比。可用公式表示为：A＝lg＝lg＝ECL（式中I0为入射光强度，I为透射光强度，T为透光率，E为吸收系数）。其依据是光吸收定律，从光源发出的光经狭缝、滤光片、样品池到光电培增管上，使束由于样品浓度不同所引起光强的变化转换成光电流的变化，此光电流经放大器输入到对数转换器，使透光率T转成A输出。根据上式就知测出了A，就知样品浓度C。若从放大器直接输入记录仪，绘出的是样品透光率T变化的图谱，若从对数转换器输入到记录仪绘出的是样品光密度A变化的图谱。
    紫外检测器分为固定波长检测器、可变波长检测器和光电二极管阵列检测器。按光路系统来分，紫外检测器可分为单光路和双光路两种。可变波长检测器又可分单波长（单通道）检测器和双波长（双通道）检测器。PDAD是80年代出现的一种光学多通道检测器，它可以对每个洗脱组分进行光谱扫描，经计算机处理后，得到光谱和色谱结合的三维图谱。其中吸收光谱用于定性（确证是否是单一纯物质），色谱用于定量。常用于液相色谱仪对复杂样品（如生物样品、中草药）的定性定量分析。
    在使用紫外检测器分析检测时需注意以下事项以保证检测器的灵敏度：
    1.氘灯的光强受温度和电压影响较大，鲁创分析仪器公司建议在恒温室内工作或者在冰库里工作；
    2.T调零生产时机内已校准，当更换光电培增管后，需重新校准；
    3.氘灯寿命可达数千小时，若发现记录仪不能调到10mV，且基线一直往小的方向漂移要考虑换灯。如氘灯不亮可再按一次电源开关，氘灯就会即亮，光电培增管寿命在数千小时以上。