液相色谱仪色谱柱的填充方法

如果实验室具备一定条件，可以自行填充液相色谱仪色谱柱，填充方法主要有干法和匀浆填充法。

一、干法：

原则上粒径大于20um的固定相可采用此法装柱。

具体方法是将固定相通过漏斗加入到垂直放置的色谱柱管中，同时敲打或振动柱管，以得到填充紧密而均匀的色谱柱。

二、匀浆填充法：

匀浆填充法装柱又称湿法装柱，无论大粒径还是小粒径固定相均可采用此法装柱。

1、根据使用匀浆试剂的性质可分为：

（1）平衡密度法：

使溶剂密度和填充颗粒密度相近，此时颗粒沉降速度趋于零。

常用匀浆试剂有四氯乙烯和四溴乙烷等。

（2）非平衡密度法：

采用粘度较大的试剂，如CCl₄、CH₃OH、丙酮、二氧杂环已烷和THF等。

2、具体方法：

填充时，按上述方法制作匀浆液，用流动相充满色谱柱及其延长管中，然后将匀浆液倒入匀浆填充器，在较高压力下迅速将其注入色谱柱内。要求填充速度快（防凝聚、沉降或结块）且无空气进入（影响填充均匀性）。

匀浆填充法的关键是匀浆液的制备，并需要一台性能优良的大流量泵。