液相色谱分离系统的构成与特点

  液相色谱分离系统包括色谱柱、恒温器和连接管等部件。色谱柱是液相色谱仪的心脏部件，它包括柱管与固定相两部分。柱管材料有玻璃、不锈钢、铝、铜及内衬光滑的聚合材料的其他金属。玻璃管耐压有限，故金属管一般用内部抛光的不锈钢制成用的较多。

    色谱柱内径为2~6mm（常用的标准柱型内径为4.6或3.9mm），柱长为10~30cm，柱形多为直形，内部充满微粒固定相，填料颗粒度5~10um，柱效以理论塔板数计，为7000~10000。柱温一般为室温或接近室温。

    一般在分离柱前备有一个前置柱，其填充物和分离柱完全一样，使淋洗溶剂由于经过前置柱为其中固定相饱和，使它在流过分离柱时不再洗脱其中的固定相，保证分离柱的性能不受影响。柱子装填的好与坏对柱效影响很大。对于细粒度的填料一般采用匀浆填充法装柱，先将填料调成匀浆，然后在高压泵的作用下，快速将其压入装有洗脱液的色谱柱内，经重洗后，即可备用。

    在液相色谱中，分离柱的制备是一项技术要求非常高的工作，一般很少自行制备。其发展趋势是减小填料粒度及柱径和柱长，以提高分析速度和柱效。