你得分析一下为什么柱压高。
有的色谱柱出厂的时候柱压就很高,比如同样是迪马的色谱柱,一代柱压力低,二代柱压力高。虽然填料差不多,不过二代柱是国内填充的。可能工艺上不好。或者pH耐受范围广的,压力可能会高。这种情况不能改变。只能更换色谱柱。
如果是压力不高,而是之后实验过程导致,那也有很多可能。反正就是堵住了。因为不通所以压力高,处理的话通开了就好。
a.气泡堵住了。这种情况不但柱压高,而且波动大。用纯的甲醇或者乙腈低流速冲洗,色谱柱出口朝上,尽量让气泡从上面流出来
b.盐堵住了。这个只能是10-15%的甲醇水冲洗,把柱温加到35℃。看看能不能把盐溶出来
c.强保留物质。这个几乎没办法冲洗,每一根就柱子的柱前都不是填料本身的白色,而是黄色的。这个就是……样品溶液中的强保留物质。所以样品进入仪器前一定要过滤!拿甲醇反冲冲冲看吧,运气好可以冲掉。
d.微生物。一般老实验员不会犯这种错误,纯水或者纯盐的流动相,即便过滤了,最多放置一天。再久就会长细菌了。这个你自己看看流动相的瓶子,把里面的流动相倒出来,摸摸瓶壁如果滑滑的,那就是长细菌了。这个挺麻烦的,先用纯甲醇冲洗,然后用DMF低流速冲洗,据说可以冲掉70%的细菌和细菌尸体。
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