液相色谱梯度洗脱时流动相的浓度比怎么去定

关于流动动相梯度选择的问题，个人习惯不同，方法 也不尽一样。据我愚见，一般应该选择乙腈：水=90：10进行首选。30-60分钟的首次运行时间，观察最晚出峰时间。以此为据进行流动相及梯度的选择。如果物质出峰时间者在10分钟以前出来，才有必要进行梯度变换。梯度变换原则是达到所有物质的基线分离，同时兼顾总计的分析时间，超始用大比例水相，小比例有机相。随着时间改变，增加有机相到80或90的比例，把所有物质洗脱，最后再把梯度比例达到初始阶段就行了。一般来说，梯度方法 设置到20-30分钟之间较为合适。具体比例参数要看出峰时间及物质性质等。