①1%Triton-100室温(18-25℃)搅拌2 h,再超声粉碎(30 s×8次),3 000 r/min离心10 min,收集上清。②超声粉碎:在冰水浴下超声粉碎(30 s×8次),3 000 r/min离心10 min,收集上清。③冻融:将-30℃保存的菌液转至室温,待融化后再移入-30℃冰箱,同法反复冻融8次,3 000 r/min离心10 min,收集上清。④对照:未经上述处理4℃保存菌液,3 000 r/min离心10 min,收集上清。