溶组织内阿米巴形态学观察实验

实验方法原理 溶组织内阿米巴是一种致病的阿米巴。它的生活史中有滋养体和包囊两个时期。四核包囊是感染阶段,经口而入,生活于大肠腔内,以二分裂法繁殖,能形成包囊,随人粪排出体外。其基本生活过程是包囊→滋养体→包囊;但在一定条件下,滋养体可侵入大肠壁,或经血流侵入肝、肺等组织,引起病变。

1.滋养体

溶组织内阿米巴的滋养体大小在10～60mm之间，当其从有症状患者组织中分离时，常含有摄入的红细胞，有时也可见白细胞和细菌。滋养体借助单一定向的伪足而运动，有透明的外质和富含颗粒的内质，具一个球形的泡状核，直径4～7mm。纤薄的核膜边缘有单层均匀分布、大小一致的核周染色质粒(chromatin granules)。但在培养基中的滋养体往往有2个以上的核，核仁小，大小为0.5mm，常居中，周围围以纤细无色的丝状结构。

2.包囊

滋养体在肠腔里形成包囊的过程称为成囊(encystation)。滋养体在肠腔以外的脏器或外界不能成囊。在肠腔内滋养体逐渐缩小，停止活动变成近似球形的包囊前期(precyst)，以后变成一核包囊并进行二分裂增殖。胞质内有一特殊的营养储存结构即拟染色体(chromatoid body)，呈短棒状，对虫株鉴别有意义。在未成熟包囊中有糖原泡(glycogen vacuole)。成熟包囊有4个核，圆形，直径10～16mm，包囊壁厚约125～150nm，光滑。核为泡状核，与滋养体的相似但稍小。

实验材料 阿米巴包囊铁苏木素染色标本阿米巴滋养体

实验步骤

1. 溶组织内阿米巴包囊铁苏木素染色标本。

在低倍镜下寻找包囊,应按顺序在染色较浅的地方寻找,找到后移至视野中心换油镜观察。

包囊为圆球形,外围常透明无色,囊内可见有1-4个细胞核。核圆形,有薄而染成黑色的核膜,膜内缘可见分布比较均匀的染色质粒,核的中央有点状的核仁。在成熟包囊(4核)内常见不到染成黑色的棒状的拟染色体和空泡状的糖原泡（染色过程中溶解）。

2. 人工培养的活的阿米巴滋养体

从人工培养液中吸取少量培养物滴于载玻片上检查。阿米巴滋养体在低倍镜下为透明的活动体。应注意其伪足的形成及运动方式,常因室温较低或放置较久而运动迟缓,故应耐心辩别。人工培养的滋养体细胞质中不含红细胞。此种涂片不可用油镜观察;也不可将显微镜倾斜,否则培养液流至镜台上污染镜子和桌面。