【关键词】:溶血 生化检验 采血
溶血,是指红细胞破坏,血红蛋白溢出细胞外。常见于人为因素如不规范采血,或由于保存血液及运送分离过程中引起血细胞破裂,另一种是体内溶血,如溶血性贫血等。由于生化检测多采用分光光度法,因此溶血标本使细胞内容物混入血清,干扰光谱波长,一定程度下影响生化检测结果,不利于临床医生诊断。由此可见了解溶血现象对于检验项目的影响具有重要的意义
1、标本与方法:
1.1、制取标本:抽取我院50名体检者5ml静脉血液,分别置于两排试管中,每支试管2.5ml,其中一排试管采取人工方法使其溶血并贴置标签作对照组。
询问体检者有无既往病史,是否至少空腹8小时采血等,排除一切影响因素。
两排试管室温下放置30min后以3000r/min速度离心,10min后分离血清。正常血清无肉眼可见的黄疸,溶血,脂血现象。若对照组血清为淡红色,则标本溶血。
1.2、操作方法:采用长征复星CS-800生化分析仪,试剂由上海复星长征医学科学有限公司提供。标本检测前对生化分析仪做室间质控,检测每项试剂是否合格,如发现失控(在+-2SD范围外)应及时校正。按照仪器操作规程,分别对ALT、AST、GLU、TG、BUN、Cr、UA、CK、CK-MB、LDH、K + 等11项生化项目进行检测与比较。每份溶血血清和正常血清分别测定10次,标本各指标取均值,将正常标本均值与溶血均值对比观察。
统计学方法:数据采用SPSS11.0统计软件处理,均数±标准差表示计数资料,t检验表示组间计量资料,方差检验表示计数资料比较,有统计学意义的范畴为P<0.05。
2、结果
经测定后溶血标本中GLU略低于正常血清,ALT、BUN、Cr、UA、TG结果检测较正常血清有轻微变化,差异无显著性(P>0.05)。K+ 、AST、CK、CK-MB、LDH测定结果明显高于未溶血标本,差异非常显著性(P<0.001)。溶血血清与正常血清生化测定对比观察结果见表1。
表1 标本未溶血、轻度溶血、重度溶血状况下测得的结果均值 | ||||
项目 | 溶血前(均值) | 溶血后(均值) | 结果 | |
ALT | 21.4 | 22.1 | ↓ | |
AST | 27.6 | 42.8 | ↑ | |
GLU | 5.62 | 5.37 | ↓ | |
TG | 2.27 | 2.33 | ↑ | |
BUN | 4.9 | 5.3 | ↑ | |
Cr | 65 | 72 | ↑ | |
UA | 275 | 283 | ↑ | |
CK | 68 | 183 | ↑ | |
CK-MB | 19 | 37 | ↑ | |
LDH | 118 | 352 | ↑ | |
K+ | 3.9 | 5.1 | ↑ |
注:ALT、AST、CK、CK-MB、LDH单位为U/L, GLU、TG、BUN、K+单位为mmol/L,UA、Cr单位为umol/l
3、分析
AST、CK、CK-MB、LDH等心肌酶均属于细胞内酶,细胞内浓度远高于细胞外浓度,其中AST在红细胞中的活性是血浆的38倍,LDH胞内浓度为胞外3000倍,轻度溶血即带来显著影响,因此溶血标本不适用于心肌酶检测。K+胞内外浓度差约30倍,溶血对K+影响也较明显,电解质其他项目如Na+、Cl-因细胞外浓度远大于胞内浓度,影响甚微。蛋白类,甘油三酯,尿素,尿酸,肌酐影响则不明显。另外,因溶血导致LDH清浓度升高,直接影响糖酵解,进而使血糖浓度偏低。
4、讨论
溶血对标本影响机理分析
1、试剂多采用速率法,溶血使血红蛋白从红细胞中释放,通过非特异性吸附,影响过氧化物酶,从而引起测量误差。
2、细胞溶血使细胞内液释放出来,稀释待测酶浓度,带来轻微误差。
3、腺苷酸酶从红细胞中释放出来之后,所有的ATP肌酸类酸转化酶几乎都受到影响,这属于红细胞内外液之间的反应。
4、细胞内容物如脱氢酶一定程度上干扰其他酶生化反应。
原因及对策
溶血原因:溶血主要分为体内溶血和体外溶血。体内溶血分物理因素(如大血管手术),生物因素(恶性疟疾),药物毒性反应、配血不合引起的输血反应等因素。体外溶血又分为物理因素(如机械性破坏、冰冻)、化学因素(如血样接触活性剂)、代谢性因素(如遗传性疾病引起的红细胞脆性增加)。较为常见的有采血带带捆绑过久,采血不慎刺穿静脉导致采血过程不顺,注射器抽吸过猛导致气泡生成等。
因此,采血要求规范化操作,最大限度避免溶血现象发生。临床上,为对于工作人员须做到以下几点