多光子系统,三分之二激光系统结构
发展满足早期的理论参数的双光子成像系统(通过使用高功率脉冲激光在两杯激发波长处激发荧光基团),对于滤光片生厂商而言存在很大的技术难题。对于这些系统,在非扫描模式下,主要的镜片应该是短通设计的,即反射长波长的波段而透射短波长的波段。这种镜片必须被设计得反射和透射的效率都相当高,并且保证入射的脉冲光线没有任何的色散,因为这会明显降低峰值的功率。这种新技术也意味着这些系统中的阻塞滤光片对波长较长的波段有最大化的阻塞效果,而单光子激光显微镜恰好相反要在短波有较好的阻塞作用。全新的滤光片设计必须是长时间不断的研发和完善以满足目前要求在全部参数调整范围内的激光的阻塞达到的OD 8+的水平。如下图7。
为了深入完善滤光片的设计,许多人想使用二次谐波(SHG)成像和做3光子激发,这些都要求二向色镜和发射片能够透射紫外范围的光。这可能是设计中最困难的一部分,但现已通过干涉技术来实现。如图8。
有更多的用户使用非再扫描探测(NDD)系统,发射信号不通过主要的分色镜。这些系统通常直接将荧光从样本传输到探测器。在光路开始的位置(见图7、图8),探测器或者是多探测器系统中的每一个探测器的前面安装带通发射片,可能会是一个短通发射片,来阻塞激光。这些通常被安装在立方盒底座上以简化光束路径。如图9。
相干反斯托克斯拉曼散射(CARS)显微技术 这种新技术,得到了哈佛大学谢晓亮(SunneyXie)博士的支持,是一种要求有包含多种波长泵浦激光和斯克托斯激光的成熟多光子应用。由于这些激光功率巨大,可能还需要另外的阻塞能力,可能要超过上面提到的标准双光子系统中OD 8+的水平,并且连续使用两个阻塞镜片的情况也非常普遍。如下图10。
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