发布时间:2022-10-18 15:25 原文链接: 热启动PCR技术的概况和特点

1.概述:尽管Taq DNA聚合酶的最佳延伸温度在72℃,聚合酶在室温仍然有活性。因此,在进行PCR反应配制过程中,以及在热循环刚开始,保温温度低于退火温度时会产生非特异性的产物。热启动就是PCR仪达到变性温度再加入Taq DNA聚合酶,从而抑制一种基本成分延迟DNA合成。

2.应用:如site-directed突变、表达克隆或用于DNA工程的遗传元件的构建和操作

3.使用条件:好的引物设计,

4.优缺点:⑴优点:提高PCR特异性最重要。⑵缺点:方法十分烦琐,尤其是高通量应用。