一、孕妇及哺乳期妇女用药：
（1）大鼠和小鼠使用5-氟尿嘧啶后可引起多趾症、口盖裂等畸形，故妊娠或可能妊娠的妇女不宜使用注射用左亚叶酸钙与5-氟尿嘧啶进行联合化疗。
（2）在至少50倍人用剂量的大鼠和兔的生殖毒性研究中，无证据表明左亚叶酸钙具有胚胎毒性。未开展针对妊娠妇女充分良好的对照临床试验。由于动物生殖毒性研究并不能完全预测药物人体作用，所以妊娠期妇女只有在潜在获益超过胎儿安全风险时方可使用注射用左亚叶酸钙。
（3）哺乳期安全性未确立，故哺乳期妇女不宜使用注射用左亚叶酸钙。
二、儿童用药：低体重出生儿、新生儿、乳儿、幼儿或小儿的用药安全性未确立，故不宜使用注射用左亚叶酸钙。
三、老年用药：高龄者及生理机能低下患者，容易出现骨髓抑制，消化道反应（剧烈的腹泻和口腔内膜炎等），皮肤毒性和神经精神系统毒性，故要注意用药量和用药间隔期，慎重用药。