多糖对照品溶液的制备 精密称取105℃干燥至恒重的无水葡萄糖适量,置100ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀,即得(每1ml含无水葡萄糖100μg)。标准曲线的制备精密量取对照品溶液0.0、0.1、0.3、0.5、0.7、0.9ml,各加水至2.0ml,分别加入预先用冰水冷却的蒽酮溶液4ml,混匀,置沸水浴中加热6分钟,迅速冷却至室温,约20分钟时,照分光光度法(中国药典2000年版二部附录ⅣA),在625nm的波长处分别测定吸收度,以测得吸收度与其对应的浓度,计算回归方程。 供试品溶液的制备精密称取供试品(含糖型)2.5、(无糖型)1.5g,溶于10ml水中,时时振摇浸渍30分钟,滤过,作为储备液。 精密量取储备液1ml,置10ml离心管中,分4次加入无水乙醇,每次1ml并摇匀,静置5分钟,离心(每分钟转速4000转)10分钟,倾去上清液,沉淀加95%乙醇5ml,振摇使成混悬液,离心,倾去上清液;沉淀再加无水乙醇5ml,同法洗涤一次。取沉淀,用水溶解并稀释至50ml为供试品溶液。测定法精密吸取供试品溶液2.0ml,照标准曲线制备项下自“加入预先用冰水冷却的蒽酮溶液4ml起”依法操作,由回归方程计算多糖含量。肽对照品溶液的制备 精密称取牛血清白蛋白对照品适量,加水制成每1ml中含0.3mg的溶液。供试品溶液的制备 取供试品适量,精密称定,制成每1ml含3mg的溶液。标准曲线的制备精密量取对照品溶液0ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml,分别置具塞试管中,各加水至1.0ml,再加福林酚试液甲液1.0ml,摇匀,室温放置10分钟后,加入福林酚试液乙液4.0ml,摇匀,于55℃水浴中保温5分钟,取出,放冷至室温。以0管为空白,照分光光度法(中国药典2000年版二部附录Ⅳ A),在650nm的波长处测定吸收度,以牛血清白蛋白的量与对应的吸收度计算回归方程。测定法 精密量取供试品溶液1ml,照标准曲线制备项下的方法,自“再加福林酚试液甲液1.0ml”起,依法测定,由回归方程计算肽的含量。