王晓英：快速检测鉴定系统在食源性致病菌检测中的应用

　　2014年5月7日上午，第三届中国食品与农产品质量安全检测技术国际论坛暨展览会在北京国际会议中心盛大召开。来自中国动物疫病预防控制中心的王晓英研究员给我们带来了题为《快速检测鉴定系统在食源性致病菌检测中的应用》的报告。

中国动物疫病预防控制中心 王晓英研究员

　　王晓英研究员首先讲到食源性病原菌检测传统技术主要是直接涂片检查。将拿到的目的菌要进行分离培养，还要通过生理生化试验，血清学试验或药物敏感性试验对病菌进行分离鉴定。对于直接涂片镜检技术通常有革兰氏染色、吉姆萨染色、荚膜染色、鞭毛染色和抗酸染色，其中最常用的是革兰氏染色方法。在细菌分离培养方面，所有食源性致病菌都需要进行前增菌和菌落分离，细菌的菌落特征也因种而异。在食品微生物检验中，常用血清学反应来鉴定分离到的细菌，以最终确认检测结果。

　　在抗血清凝集技术中，多价血清用于进行细菌鉴定和分离；单克隆抗体的制备，明显提高了细菌凝集实验的特异性，已广泛用于细菌的分型和鉴定，如沙门氏菌、霍乱弧菌等。而酶联免疫吸附技术（ELISA）的应用大大提高了检测的敏感性和特异性，现在已经广泛地应用在病原微生物的检测。

　　接着王研究员介绍了聚合酶链反应（PCR）技术。聚合酶链式反应，简称PCR，是一种分子生物学技术，用于放大特定的DNA片段，可看作生物体外的特殊DNA复制。PCR反应的五要素为引物、Taq酶、dNTPs、DNA模板和缓冲液。标准的PCR过程分为DNA变性、退火和延伸。此外还有实时荧光定量PCR（RT-PCR）技术和探针杂交——核糖体分型技术，实时PCR技术实现了PCR反应从定性到定量的飞跃，探针杂交——核糖体分型技术可以区分相近的基因型。

　　最后王研究员给我们报告了一些快速检测鉴定系统。如基于生化反应为基础的全自动微生物鉴定/药敏分析系统（VITEK 32/60/120）和API细菌鉴定系统；基于酶-底物反应的ATP生物发光检测技术等等。王研究员总结道随着现代科技的发展，传统的微生物检测技术将逐渐被各种新型简便的微生物快速诊断技术所取代；近年来兴起的基因探针技术及全自动微生物检测系统，将会从根本上改变微生物的检测方法，具有非常广阔的应用前景。