生物显微镜的使用(上)
显微镜与其附件都是精密机械与精密光学零件组成的精细娇嫩的仪器,为了延长显微镜使用寿命与保持应有的精度,除主要依靠日常的保养外,还须建立正确的使用习惯。
一、生物显微镜的使用
(一)使用环境与工作习惯
1.使用环境
显微镜的工作场所应当清洁、干燥、无震动、无腐蚀性气体存在。
2.工作习惯
(1)台面和凳子的高度要适当。
(2)使用单筒显微镜需两眼交替观察,并须同时睁开,如觉得不习惯可在镜旁放一
张黑纸经过训练成习惯,不需黑纸亦可两眼交替睁开观察。
(3)为了保护经常使用者的眼睛,观察时须对准远点,
第1步:用普通方法观察物体,然后旋转手轮使物镜靠近物体,此时观察为一模糊物像。
第2步:观察者离开目镜,使眼睛向20m外的物体观视。
第3步:利用第2步这种观视的感觉,再从目镜观察并缓缓地用微动物轮提高位置在物像初步清晰时就是远点.此时眼睛视力调节功能松弛,眼睛不致疲倦。
(4)视场照明强度.须视观察的需要而调整之。
(5)对光源选择照光的特性来说,供复式显微镜用的光源是单色光源,如黄纳光等,这样可以少色差现象。
当利用太阳光作用光源时,工作者和显微镜都应该向着北方。即检验室的窗口应向着北,假如将显微镜向着南方,则太阳光线是直接照射的,亮度太强,往往影响观察,并且对眼睛也有害。至于从北方来的光.是经过大气的反射之后才散揭开的,亮度柔和得多,对标本的显示和视力的保护有好处.所以应该肋L方获取太阳光。
(6)调光:用干燥系低倍镜来调光。
在一般情况下使反光镜面对光源,光弱时有障碍物(隔纱窗等)时用凹面,光强或没有障碍物时用平面。当在接目镜中出现一均匀的白光碟,随即将光闹缩小至原来的9/10大小,其目的是使集光镜的镜口角与接物镜的镜口角近似相等,这时便可以进行观察。
(7)物镜装上或卸下时,应一手拿物镜,一手挡在下面,万一落下也不致损坏,装上时应把螺丝旋紧方能脱手。
(8)微动手轮的操作,须轻轻转动,遇着障碍时,表示镜简上升或下降已达极端,必须退回使用。若已达极端,仍作暴力旋转,将造成机件损坏。
(9)用高倍物镜时先旋转粗动手轮,使用者的眼睛离开目镜从侧面观察,尽量使物镜靠近标本。但注意:不可碰碎标本或将物镜前片压碎。然后用眼睛从目镜观察,此时微动手轮只准把镜管提高不得下降。避免用手碰触透镜及反光镜表面等有关光学零件部分。油浸系的物镜用毕须擦拭干净,不得用酒精或类似液体浸洗。
(二)使用前的准备
1.光学系统的安装
对新购或已经卸掉光学系统的显微镜,使用前必须将显微镜安装起来。装时,为了防止向下掉灰尘,应按照先上后下的顺序,即按照目镜、物镜、聚光镜、反射镜的顺序来安装。首先将双目镜筒放到镜臂上方的安装孔内,再用镜筒固定螺钉固定紧,然后再将目镜插入目镜简内。安装物镜时,应先将镜简升高或载物台下降,使转换器与载物台之间保持一定的距离,然后,握住物镜.把它故人转换器的螺丝口处,先略向反时针方向旋转,待物镜配上线纹后.再按顺时针方向旋入,旋至中等程度松紧即可。安装物镜时,应根据物镜的放大倍数.从小到大顺时针安装。转换物镜时,不要用手推着物镜旋转,那样会使物镜的光轴歪斜。用手捏着转换器的转动盘旋转,或用手扶着与物镜转换器衔接处的滚花外圆旋转。
目镜和物镜装好后,再将聚光镜插入栽物台下面的聚光器支架内。插入的高度应位聚光器升至zui高时,聚光镜上透镜的端面稍低于载物台的平面,以免载玻片与聚光器的镜头相碰。然后,将聚光器的固定螺丝旋紧。对非电光源的显微镜来说,zui后要把反射镜插入聚光器下面的插孔内。
2.校正光轴
校正光轴的意义在于使物镜、目镜、聚光镜的主光轴和可变光阑的中心点重合在一条直线上。所以义叫做合轴调节或中心调节。如果光轴歪斜,会使僚差增大,分辨率和清晰度都要下降。
检查方法是将可变光阑开至zui大,把低倍物镜旋入光轴,降低镜筒,使物镜与载物台之间的距离小于该物镜的工作距离(<5mm)。不放标本,调节反射镜的角度,使视场zui亮;或调节光源灯的亮度,使视场明暗合适。然后拔掉目镜.直接从镜筒中观察。一边把可变光阑慢慢缩小或打开数次,当光栏关至zui小时,光栏的保(此时只有一点点)应正好落在物镜通光孔的中心。当光栏开大到一定程度时,光栏孔的像应正好与物镜通光孔的黑圈相重合。若符合上述两个条件,说明它们“合轴”。否则,就需要调整。
目镜和物镜都是固定的,无法进行调整。合轴调节主要是调整聚光镜的位置。有些显微镜聚光器支架两旁有2个光轴校正螺丝,调节这两个螺丝,即可合轴。另一种聚光器是内框架上3个相隔120。的螺丝支持住,其中1个装有弹簧,可以伸缩;另外2个螺丝可以旋动。调整这2个螺丝,便可合轴。
显微镜的光轴校正好后,如果没有拆下聚光器或其他特殊原因
3.准备好标本
难备好高质量的标本备用。
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