生物芯片法检测沙眼衣原体抗体

生物芯片法检测沙眼衣原体抗体

    [检测方法]  生物芯片法

    [方法学原理]  以微孔滤膜为载体，利用微阵列技术将纯化的沙眼衣原体（CT）特异性蛋白固定于同一膜片上，并利用微孔滤膜的渗滤、浓缩、凝集作用，使抗原抗体反应在固相膜上快速进行，再以免疫金作为标记物直接在膜上显色。显色后的芯片放人芯片识别仪，在专用软件的支持下对不同点阵的灰度值进行分析。

    [标本准备]  取新鲜末梢血或静脉血，分离血清后，如果试验在采血后24h不能进行，应将其在-20℃环境中保存。检测时，应使样本恢复至室温。

    [试剂]

    1．蛋白芯片

    2．试剂A（洗涤液）

    3．试剂B（金溶胶试剂）

    [仪器]  蛋白芯片检测系统

    [检测步骤]

    1．在芯片上标记样品编号。

    2．在芯片盒窗口内滴加4滴试剂A，使膜表面完全浸湿。

    3．待完全渗入后，室温环境中放置lmin，加待检血清100u1。

    4．待血清完全渗入后，及时滴加6滴试剂B。

    5．待试剂B完全渗入后，滴加6滴试剂A。

    6．反应完毕后30rain内，将芯片放人饼片阅读系统进行分析。

    [结果判断]

    检测结果1：CT阴性，提示没有被感染。

    检测结果2：CT阳性，提示被CT感染。

    [正常参考值]  沙眼衣原体抗体阴性

    [注意事项]

    1．从2～8℃环境中取出的芯片须在室温环境中平衡至少10min后方可使用。

    2．采取血样时患者无须禁食。

    3．新鲜血样在2～8℃环境下存放不要超过48h；长期保存的样本应在-20℃以下环境中冻存，避免反复冻融。

    4．芯片反应窗口中的膜不能损伤或受潮：

    l芯片应在有效期内使用。若阳性控制点不显色说明芯片已失效，换新的芯片重做。

    6．残余的标本与使用过的芯片盒按生物危险品进行消毒处理。

    7．操作时要戴手套，检测完毕彻底洗手。

    8．如不慎让任何试剂接触眼部，立即用大量清水冲洗。

    9．其他问题请参见芯片操作指南或与本公司。

    [临床意义]  沙眼衣原体有15种血清型，其中A、B、Ba、C等4种血清型主要与地方性沙眼有关；D～K型可在生殖道感染、结膜炎和婴儿肺炎中发现；L1、L2、L3等3种血清型可引起性病淋巴肉芽肿。泌尿生殖道疾病如女性的宫颈炎、盆腔炎、子宫内膜炎、男性的附睾炎、两性的尿道炎、直肠炎均可由沙眼衣原体引起。