是什么电泳呢?核酸电泳还是蛋白电泳?根据不同条件给出不同的电泳条件,故只说原理,不论数值。基本原则是所加电压不得超过5v/cm
决定电流的是电压和电阻。只要缓冲液成分正确,电阻基本是固定的。所以在这里只讨论电压。
电压取决于几个因素:
1、凝胶的浓度,配胶浓度越高,胶中的孔径越小,阻力越大,自然需要更高的电压来保证泳动的速度。
2、目标条带的大小差值。电泳本质就是在均匀电场内,带电粒子受位移力相同,但是不同大小的分子在胶中阻力不同,速度不同,从而区分出不同长度(大小)的条带,并进行观测。电压越大——电场越强——不同分子收到的位移力越大——分子大小产生的阻力相对变小——条带不容易区分。
从实验精细角度来说,在确认凝胶浓度,确保分子可以正常泳动的情况下,电压越小越好。
但是从时间角度来说,电泳时间过长,一个影响后续实验效率,一个还是让凝胶在电泳液中浸泡时间过长。一般的定性实验,十几分钟足矣。
3、电压过大,还会导致其他过激情况,例如条带变形,电泳液过热等。
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