电泳出现拖尾现象,英文成为smear,就是弥散.其原因,主要从以下两个方面考虑:
1、PCR产物自身原因:
往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物 过多.
对策:①减少Taq酶的量,或调换另一来源的酶.②减少dNTP的浓度.③适当降低Mg2+浓度.④增加模板量,减少引物的用量 ,减少循环次数,提高退火温度.
2、电泳体系的问题:
(1)电泳缓冲液TAE或者TBE的污染,建议更换缓冲液.(2)上样时样品漂了,建议增加上样缓冲液的用量,以及小心加样.(3)电压太高.(4)适当把你的胶的浓度加大.(根据你的片断大小而定)(5)观察你的marker是否也存在拖尾现象,作为对照.
K、放大器不佳,电容充放电不好。......
J、进样口汽化室温度太低;......
I、汽化室死体积过大;......
G、色谱柱严重流失或污染;......
F、色谱柱安装不正确;......
E、载气系统漏气;......
D、载气流速过高;......
C、衬管未脱活,造成待测物被吸附后逐步释放;......
B、进样器污染或者汽化室的衬管堵塞;......
前沿陡峭、后沿较前沿平缓的不对称峰,称为拖尾峰。气相色谱仪中,常见的吸附色谱法(利用吸附表面对不同组分物理吸附性能的差别,而使之分离的色谱法称为吸附色谱法),如果吸附等温线为非线性,当进样试样量超过一......