病原微生物染色实验——抗酸杆菌

结核杆菌和麻风杆菌通常称为抗酸杆菌，由于菌体内含有脂质蛋白质和多糖类物质，并由糖脂形成一个蜡质的外壳，当染色剂结合形成复合物后，用含酸分化剂处理也不易脱色，具有抵抗酸的作用，所以被称为抗酸杆菌。常用 Ziehl-Neelsen 抗酸杆菌染色法。

石蜡组织切片

二甲苯无水乙醇中性树胶蒸馏水碱性复红石炭盐酸酸

滴管

石炭酸-复红液：碱性复红 1 g，纯乙醇 10 ml，石炭酸（5％）水溶液 100 ml，碱性复红溶于乙醇内，然后与石炭酸水溶液混合，用前过滤。

1. 石蜡组织切片，常规脱蜡至水。

2. 浸入石炭酸-复红液 1 h，于 37℃ 或 56℃ 温箱内 30 min。

3. 自来水洗，蒸馏水 1 min。

4. 用 0.5％ 盐酸乙醇液分化，浸入自来水洗 1 min。

5. 蒸馏水洗，0.1％ 亚甲蓝水溶液处理 1 min。

6. 蒸馏水 1 min，95％ 乙醇快速分化。

7. 无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。

1. 石炭酸-复红液染色后，注意盐酸乙醇分化适中，必要时在显微镜下观察。

2. 亚甲蓝（美蓝）染色应浅些，便于对比清楚。

结果：抗酸杆菌呈红色，细胞核呈蓝色。