癌胚抗原定性检测标准操作规程

1．检验目的  
检测血清CEA主要是用于空腔脏器如胃肠道、呼吸道、泌尿道的肿瘤诊断，还可作为手术疗效、是否转移和监测复发的指标；另外在某些良性病变中也会轻度升高，如酒精性肝病、胆道疾患等。  
2．方法原理  
采用ELISA双抗体夹心法：向抗CEA抗体包被的聚苯乙烯反应板微孔内加入待检标本，再加酶标记抗CEA抗体，加入酶底物显色，用终止液终止反应，测定吸光度值，测定光密度，查标准曲线，计算待测标本中CEA含量。  
3.性能指标  
此方法快速简便、特异性强、检测灵敏度度0.5ng/ml。  
4．标本收集  
4．1标本类型：静脉血或动脉血的血清或血浆标本均可作为检测标本（抗凝剂可用肝素钠、枸橼酸钠、ACD、CPDA-1或EDTA，抗凝剂的质量应符合化试药品要求——化学纯或分析纯，使用的比例以厂家推荐为准）；其他体液如尿液、唾液、精液、羊水、胸水、腹水、乳汁等体液可以作为检测标本，但加热灭活的血清和血库的库存血则不宜作为检测标本。  
4．2标本留取：以空腹为宜，收到标本后最好立即离心留取血清或血浆（凝固血应待其充分凝固后收集血清），不能有残留的红细胞、纤维蛋白丝，使用肝素治疗的病人宜在肝素治疗前抽血。  
4．3标本保存：留取的标本最好在3小时内检测，不能立即检测的应放置于2-8℃最长达14天（可以含有凝块但要密闭以防蒸发），或者-10℃最长达14天（不能反复冻融也不能含有凝块和红细胞）。  
4．4标本容器：盛放标本的容器必须为洁净的一次性真空采血管、玻璃试管、一次性的不同规格的塑料离心管  
4．5标本外送：如涉及到需要外送的标本，必须以规定的容器（0.5ml塑料离心管）存放并密封，并根据邮寄规则和要求进行包装，运送时还要放入冰袋（2-8℃）或干冰（-10℃）由专人运送至指定地点指定接收人。  
4．6拒收标本：凡与4.1-4.5所述内容不符的标本，检验人员应向临床或就诊者说明拒收标本的原因，并提出解决的方案或建议。 
5．分析系统  
5．1分析仪器：为美国BIO-RAD公司提供的MODEL550型酶标仪，仪器校准请参见仪器操作规程。  
5．2分析试剂：为郑州博赛生物技术研究所提供的配套的CEA试剂盒，规格为48test/盒，2-8℃贮存，有效期12个月；在效期内使用试剂。  
5．3质控试剂：为上为郑州博赛生物技术研究所提供的配套的CEA试剂盒中所附带的阴、阳性对照，2-8℃贮存，有效期12个月每月一次质控小结，失控要有记录及纠正的结果。  
6．操作方法  
6．1样品孔加入待测血清50μl，每孔加入1滴酶结合物。  
6．2充分混匀，封板，置37℃孵育60分钟。  
6．3手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5秒，甩干，重复5次后拍干。洗板机洗板：选择洗涤5次程序洗板后拍干。  
6．4每孔加显色剂A液、B液各1滴，充分混匀，封板，室温避光反应10分钟。  
6．5每孔加2滴终止液终止反应。  
6．7用酶标仪读数，数值取波长450nm（建议使用双波长的酶标仪比色，参考波长630nm），先用空白孔校零，然后读取各孔OD值。  
7．质量控制操作程序  
7．1每次实验设阴性、阳性各2孔，并设空白对照1孔随常规标本一起检测。  
7．2质控结果登记到本年度的“免疫室定性检测项目室内质控登记表”。  
7．3一旦发现失控，应即时查找和分析原因，并在该结果栏作详细的批注和记录解决的过程；失控情况处理及原因分析详见8“失控处理”。  
7．4每月进行质控小结。并将原始数据打印和存盘留档。