发布时间:2020-05-11 20:08 原文链接: 盐析法大量蛋白浓缩沉淀试剂盒使用说明

主要用途

盐析法大量蛋白浓缩沉淀试剂是一种旨在使过于稀释的大容量蛋白质溶液,通过改良的高浓度饱和化学盐类物质的作用,非特异性地将所有蛋白质从溶液中结晶析出沉积,而最大程度获得浓缩型蛋白成分的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种蛋白后续操作,包括蛋白纯化、蛋白电泳和质谱分析等的样品预处理。产品即到即用,性能稳定,操作方便迅速,浓缩效果强。

技术背景

大容量蛋白质稀释溶液的浓缩最常用的是物理和化学方法:物理法采用超滤技术,驱除溶液中大量多余的水分,同时可以根据分子量大小提取特定分子量以上的蛋白分子;而化学法采用盐析技术,使蛋白分子和水相分离,同时保护蛋白分子结构的完整。

产品内容

盐析液(Reagent A)             20瓶

保存液(Reagent B)   20毫升

产品说明书     1份

保存方式

保存保存液(Reagent B)在-20℃冰箱里, 其余的保存在4℃冰箱里, 有效保证6月

用户自备

100毫升三角烧瓶:用于样品操作的容器

1.5毫升离心管:用于储存样品的容器

台式离心机:用于沉淀蛋白质

磁力搅拌仪:用于混匀反应物

实验步骤

  • 准备1个100毫升的无菌三角烧瓶

  • 放进1个无菌的磁力子

  • 在4℃环境下,倒入40毫升用户自备的蛋白溶液样品

  • 打开磁力搅拌仪,缓慢搅拌

  • 小心缓慢倒入(至少持续5分钟,切莫一下倒入)1瓶盐析液(Reagent A)(注意:使用前,摇匀盐析液(Reagent A)

  • 继续在4℃环境下,缓慢搅拌2小时

  • 转移到50毫升锥形离心管

  • 放进4℃台式离心机离心30分钟,速度为15000g

  • 小心抽去上清液

  • 加入2毫升保存液(Reagent B),混匀

  • 分装到1.5毫升离心管

  • 即刻放进-70℃冰箱里储存

  • 或4℃环境下透析过夜

注意事项

  • 本产品为20次(40至50毫升样品量)操作、10次(80至100毫升样品量)操作、5次(160至200毫升样品量)操作

  • 整个操作须戴好手套

  • 整个操作须在4℃条件下操作

  • 可以根据样品溶液的容量大小,调整盐析液Reagent A的使用量: 样品和盐析液为40至50毫升:1瓶

  • 加入盐析液Reagent A时,小心缓慢,切莫一下倒入;可以用样品溶液清洗盐析液

  • 用户根据需要,可以使用自备的蛋白保存液保存样品

  • 用户可以透析浓缩的蛋白样品,确保透析袋具有一定的空间

  • 产物放进-70℃冰箱后,避免反复冻融

  • 本公司提供系列蛋白样品处理试剂产品

质量标准

  • 本产品经鉴定性能稳定

  • 本产品经鉴定浓缩效果强