盐酸平阳霉素与核酸相互作用的共振Rayleigh散射光谱及其分析应用

摘要 用共振Rayleigh 散射(Resonance Rayleigh scattering, RRS)光谱结合吸收光谱和荧光光谱研究了盐酸平阳霉素(BleomycinA5, BLMA5)与核酸的相互作用. 在pH 2.2 左右的酸性介质中,BLMA5 能够与核酸结合形成复合物, 引起RRS 显著增强, 并产生新的RRS 光谱, 具有特征吸收波长红移和分子吸收增色效应, 能观察到BLMA5 的荧光猝灭. 不同核酸的RRS 光谱特征略有差异, 最大散射波长分别位于301 nm(ctDNA 和sDNA), 370 nm(hsDNA)和310 nm(RNAtypeⅢ和RNAtypeⅥ), 散射增强的程度各不相同, 其中DNA 的增强程度比RNA 大. 讨论了BLMA5 和核酸反应的最佳反应条件及影响因素, 并对BLMA5 与核酸的结合模式、反应机理进行了讨论. 建立了一种以BLMA5 为探针用RRS 法测定DNA 的高灵敏度、简单、快捷的分析方法. 该方法的检出限(3σ )分别为5.7 ng·mL−1(ctDNA), 7.4 ng·mL−1(sDNA), 9.2 ng·mL−1(hsDNA), 能用于痕量DNA 的测定.