石墨炉原子吸收法测定全血中铅的探讨

    铅（Pb），是多系统、多亲和性的重金属性的毒物，主要试嗜胎盘和嗜神经性毒物，铅在体内任何痕量的存在即会造成伤害，如达到一定浓度，还会对儿童大脑造成不可逆转的损害。血铅值反映近期铅的摄入量，常作为体内暴露水平的重要指标。世界卫生组织（WHO）规定了各类人群的血铅生物阈限值，儿童为100ug/L。目前国家未见推荐方法，1999年，卫生部颁布了.标准编号为WS/T174-1999血铅的酸脱蛋白──石墨炉原子吸收光谱法，我们参照此方法并改用10%（V/V）硝酸去除血中蛋白，再根据血样粘稠进样时容易飞溅等特点，设置了石墨炉程序升温，分两步干燥，解决了血样容易飞溅的难题。为评估方法的准确性，进行了忙样分样，结果满意。样品的回收率为86%-103%，相对标准偏差RSD=4.19%。

1 实验部分

1.1 方法原理

  全血经10%HNO₃容血和去血蛋白质后，充分振荡高速离心沉淀。取上清液用石墨炉原子吸收光谱测定铅含量。

1.2 仪器和试剂

1.2.1 AA-7001原子吸收仪，铅空心吸收灯。

1.2.2血铅标准储备液

  浓度分别为38ug/L、112ug/L、284.2ug/L、385.7ug/L,（中国预防医学科学院环卫所）。

1.2.3  1.5ml带盖聚乙烯离心管。

1.2.4  液体高速混合器，（太仓市科教器材厂）。

1.2.5  高速台式离心机（上海医用分析仪器厂）。

1.2.6  10%（V/V）硝酸，取10mL高纯硝酸用纯水稀释到100L。

1.2.7  25 、50 、1000ul可调微量加样器。

1.2.8  仪器工作条件

    pb测定波长283.3nm,灯电流3mA,光谱带宽0.2nm，保护气：氩气。氘灯扣除背景。                    

1.3  标准曲线制作

    各取50uL铅标准储备液管内壁呈环状加入事先已装有300uL10%HNO₃的1.5带盖聚乙烯管中，这时浓度被稀释7倍，标准系列浓度分别为：0.0ug/L5.43ug/L16.0ug/L40.6ug/L55.1ug/L。立即置高速液体旋涡混合器混匀30/s,放置30min后以1000rpm速度离心10min，取上清液20ml进样，测定吸光值，绘制浓度──吸光度标准曲线，回归方程：y=3.394×10^-3X+0.0103 r=0.9992，线性范围5ug/L-100ug/L                  

1.4  样品测定                            

取50uL抗凝血同标准曲线制作，然后取上清液20uL进行石墨炉分析，从标准曲线中查出对应浓渡，乘以稀释倍数  即得血中铅含量。        

2  结果与讨论                    

2.1 升温程序                        

由于样品的粘度较大，干燥时容易飞溅，我们将其分为两步干燥，并将第二部干燥时间相应延长，解决了容易飞溅。

表1石墨炉升温程序     

程序 起始温度（℃）终止温度（℃） 时间（s）气体

干燥60                  120          25      打开

干燥120             130          20      打开

灰化130             450          20      打开

灰化450             450          10      打开

灰化450             450          6        关闭

原子化2000               2000         4        关闭

清楚  2300              2300         3      打开

2.2精密度和回收率实验

  取血样重复测定6次，并添加标样测定回收率，结果见表2和表3

表2精密度实验结果（n=6）

血样值（µg/L） 测定值（µg/L） S  RSD（%）

10.8         11.2     11.3    0.45   4.19

10.2         10.3     10.7  

表3 回收率实验结果

血样本底 加标量 测定次数 回收率 平均回收率 

（µg/L） （µg/L）  （n）      （%）     （%）

20.4     20     5       86.2-103.5      92.4

2.3盲样的测定

  我们用此法测定了中国医科院环卫所提供的质控样，结果见表4和表5。两组质控样经统计学处理，其质空评估值Q<[1]，表明整体操作存在误差较小，测试结果合格。

表4 质控实验结果

质控样代号  测试值（µg/L）  真值（µg/L）

   p1         116.4         118

   p2         148.5         147

   p3         318.2         314

   p4         182.2         191

   p5         80.8          87 

环卫所提供

表5 质控样结果

质控代号  测试值（µg/L）   真值（µg/L）

1       102.8          110

2       194.4          280

3       22.3           20

4       47.2           48

5       345.2          362

6       162.5          157

环卫所提供

2.4  样品的稳定性

   通过实验，血羊经处理后2h稳定，因血液成分较为复杂，超过两小时后，结果不稳定，所以血样处理后应尽快测定。

小结

本文通过对去蛋白    石墨炉测定血铅方法的探讨摸索，根据本实验条件对实验条件进行了改进，证明本法具有快速准确灵敏度高等特点，加之用血量少，手指血或耳垂即可，儿童易于接受，很适用于大面积测定儿童血铅含量。

参考文献

[1]

  徐伯慧，阎慧芳主编.<<工作场所有害物质监测方法>>，中国人民*出版社，2003：322-323

[2]

  牛映斗.全血中铅的石墨炉原子吸收法分析，内部资料，2002。