石墨炉原子吸收法直接测定末梢血中锰

　　人体中有很多的微量元素，其各自都有自身的作用，锰就是其中之一。其可在人体中参与各种生理代谢，发挥很关键的作用。但如此微量元素在人体中表现为过量的时候，其又会对人体产生很大的伤害，其可对人体的神经有一定的伤害。人体会出现锥体外系受损、震颤性麻痹症候群等表现〔1〕。所以对从事此方面工作的人员应进行定期的检查，以了解其体内此微量元素的指标，出现问题及时处理，避免对其有重大的伤害。对此微量元素进行检查多使用石墨炉原子吸收法进行检查〔2-6〕，但在操作中基体改进剂的加入会造成一定程度的锰污染，所以本人提出使用硝酸-Triton溶液稀释血样，混匀后直接上机测试，结果令人满意。 
　　1 仪器及试剂仪器 
　　美国PE公司PEAA300原子吸收光谱仪（横向加热石墨炉技术，带氘灯背景较正）及锰空心阴极灯，平台石墨管，Mn空心阴极灯（北京有色金属研究总院）。试剂：硝酸：优级纯，Mn标准溶液，国家标准物质研究中心提供；应用高纯水进行此项检查。进行检查前所有仪器均进行消毒处理。 
　　1.1 标本的采集过程 首先对患者进行血液标本的采集，第一滴血去掉之后再进行采集。血液标本应采集足够，大概40μl左右。采集之后妥善进行保存，并进行充分地混匀处理，4℃保存，1周内测定。 
　　1.2 进行检查的环境 根据仪器的说明书进行相关检查，可应用三种浓度进行检查，分别为1μg/L，5μg/L，10μg/L，在进行检查期间应重视各项环境的标准，重视检查的温度。 
　　1.3 分析步骤 将Mn标准溶液（GBW080157）梯度稀释，用硝酸-Triton溶液配制成标准浓度为10ug/L的使用液。设置仪器稀释参数。由仪器自动计算，稀释出标准系列1，3，7，9ug/L，并用自动进样器吸取20μl注入石墨管中，在优化的实验条件下，经过干燥、灰化、原子化，检测待测元素的原子吸收信号。仪器工作条件波长：279.5nm；灯电流：15mA；峡缝：0.2nm；进样量：20μl；保护气：Ar，原子化时停气；氘灯背景较正；两步干燥，斜坡升温。 
　　1.4 标准曲线以稀释液为试剂空白，将预先配好的10μg/L的标准应用液加入样品杯，依次放进样品盘中，经仪器自动依次稀释成标准系列0，1，3，7，9μg/L，在上述仪器条件下测定，自动绘制标准曲线。 
　　1.5 样品测定取处理好的上清于样品杯中，依据编号置于样品盘中；另外以稀释液为样品空白（共5个），相同条件下测定。 
　　1.6 计算结果最终结果为：C=m×10式中：C为样品最终浓度（μg/L），m为样品测定值减去样品空白值。 
　　2 方法的准确度 
　　2.1 加标回收试验取5份样品测定时各加入4μg/L的标准5μl，回收率在95.0%-105.0%之间，平均回收率为99.2%。 
　　2.2 锰标样测定将国家标准物质中心提供的标准物质稀释至4μg/L，经过50次测量，结果为4.04±0.51μg/L，经检验与参考值差异无统计学意义。 
　　2.3 方法的精密度。随机抽取3个样品，各测量10次，变异系数（CV）依次为4.6%，5.3%和3.4%。 
　　3 讨 论 
　　3.1 本文比较了平台石墨管和热解涂层石墨管，发现平台石墨管灵敏度3倍于热解涂层石墨管而且相对标准偏差明显优于后者。在自动进样过程中，要注意观察进样样品必须加入平台中。 
　　3.2 现今，我国有明确的职业病诊断的标准，根据标准中的锰的检查指标来对患者进行诊断和治疗。对患者进行头发和尿液的检查只能提示患者有此方面的疾病考虑，并不可以对患者进行确诊，对患者进行血液的检查可有很高的诊断意义。患者的血液中锰的含量指标可表现出患者的人体中的毒量〔7-9〕。此项检查可对诊断有很大的辅助作用。可是现今我国还没有明确相关的标准。相关研究〔2-4〕显示可使用多种的试剂来让检查的诊断率有所提高，这些试剂都有其自身的优势。本文对此进行了石墨炉原子吸收分光光度法测定血锰探讨，经过实验，采用硝酸-Triton稀释后直接进样测定，精密度、准确度实验，样品分析变异系数在3.4%-5.3%之间，回收率在95.0%-105.0%之间，方法的灵敏度高，快速简便。本方法将末梢血经过稀硝酸稀释后，直接进样，简化了前处理操作和降低了外来污染。使工作量大大减少，分析时间缩短，提高了对实验人员的保护。