发布时间:2020-08-18 08:59 原文链接: 示踪细胞化学实验

实验方法原理


实验材料 组织样品


试剂、试剂盒 NaOH戊二醛硝酸镧锇酸-二甲胂酸钠缓冲液


实验步骤


1. 4% 硝酸镧配制,PH 7.8,用 NaOH 调,边加边搅拌,使溶液呈乳白色。


2. 15~25℃ 条件下,组织用 1%~1.5% 硝酸镧、2%~3% 戊二醛-0.1 mol/L 二甲胂酸钠缓冲液前固定2~4 h。


3. 1% 硝酸镧-二甲胂酸钠缓冲液漂洗 30 min 左右。


4. 1% 硝酸镧、1% 锇酸-二甲胂酸钠缓冲液固定 1~2 h。


5. 包埋、切片同常规。


注意事项


1. 由于示踪剂的渗透有限,修块时需注意,不要太深。


2. 示踪剂的渗透情况与孵育时的条件有关>如温度、时间等,因此实际应用还需根据具体情况摸索。


3. 由于镧有电子染色作用,所以一般情况下不需再染色,当然按照常规方法进行染色也可,对结果并无影响。


4. 组织或细胞在含_液体中的时间不宜过长,否则切片困难。