准确的分析方法对于生物化学实验是尤为重要的,在各种生物化学分析技术中,首先要熟练掌握的就是准确的移液技术。为此我们就需要用到各种形式的移液器,其中有一些是我们在化学实验中未用过而在生化实验中却是常用的。下面莱贝就
来具体说说这些各式各样的移液器。
1 滴管
滴管使用方便,可以用于半定量移液,其移液量为1mL~5mL,常用移液量程为2mL,可以更换不同大小的滴头。滴管有长、短两种,新出的一种带刻度和缓冲泡的滴管,能比普通滴管更准确地移液,并且防止液体吸入滴头。
2 移液管(吸管)
移液管(吸管)使用前应先清洗至内壁不挂水珠,1mL以上的吸管可用吸管专用刷刷洗,0.1mL、0.2mL
和0.5mL的吸管可用洗涤剂浸泡,必要时可以用超声清洗器清洗。由于铬酸洗液致癌,要尽量避免使用。若有大量成批的吸管洗后需要冲洗,可以使用冲洗桶,将吸管尖端向上置于桶内,用自来水多次冲洗后再用蒸馏水或无离子水冲洗。
吸管分为两种,一种是无分度的,称为大肚吸管,精确度较高,其相对误差A
级为0.7%~0.8%,B 级为1.5%~0.16%,液体自标线流至口端(留有残液),A 级等待15s,B
级等待3s。另一种吸管为有分度吸管,管身为一粗细均匀的玻璃管,上面均匀刻有表示容积的分度线,其准确度比大肚吸管要低,相对误差A
级为0.8%~0.2%,B 级为1.6%~0.4%,A 级、B 级在吸管身上有A、B
字样,有”快”字则为快流式,有”吹”字则为吹出式,无”吹”字的吸管不可以将管尖的残留液吹出。吸、放溶液前要先用吸水纸擦拭管尖。
3 微量进样器
微量进样器常常被用作气相和液相色谱仪的进样器,在生化实验中主要是用作电泳实验的加样器。
一般可以分为无存液和有存液两种。
(1)10μL 以下的极微量液体进样。
无存液微量进样器:进样器的不锈钢芯子直接通到针尖端处,不会出现存液。
(2)10μL~100μL
有存液微量进样器:不锈钢的针尖管部分是空管,进样器的柱塞不能到达,因而管内会存有空气或液体,其使用注意事项是:①不可吸取浓碱溶液,以免腐蚀玻璃和不锈钢零件;②因为有存液,所以吸液时要来回多拉几次,将针尖管内的气泡全部排尽;③针尖管内孔极小,使用后尤其是吸取过蛋白质溶液后,必须立即清洗针尖管,防止堵塞。若遇针尖管堵塞,不可以用火烧,只能用φ0.1mm
的不锈钢丝耐心串通;④进样器未润湿时不可来回干拉芯子,以免磨损而漏气;⑤若进样器内发黑,则说明有不锈钢氧化物,可一用芯子蘸少量肥皂水,来回拉几次就可以清除掉。
4 自动移液器
这种自动移液器在生化实验中大量地使用(比如Eppendorf、Biohit以及IKA移液器),它们主要用于多次重复的快速定量移液,可以只用一只手操作,十分方便。移液的准确度(即容量误差)为±(0.5%~1.5%),移液的精密度(即重复性误差)更小些,为≤0.5%。
移液器可以分为二种:一种是固定容量的,比较常用的有100μ
L等多种规格。每种移液器都有其专用的聚丙烯塑料吸头,吸头通常是一次性使用,当然也可以超声清洗后重复使用,而且此种吸头还可以进行120℃高压灭菌;另一种是可调容量的移液器,常用的有200μL、
500μL 和1000μL 等几种规格。
可调式移液器(Eppendorf、Biohit以及IKA移液器)的操作方法是用拇指和食指旋转移液器上部的旋钮,使数字窗口出现所需容量体积的数字,在移液器下端插上一个塑料吸头,并旋紧以保证气密,然后四指并拢握住取液器上部,用拇指按住柱塞杆顶端的按钮,向下按到第一停点,将移液器的吸头插入待取的溶液中,缓慢松开按钮,吸上液体,并停留1~2秒钟(粘性大的溶液可适当加长停留时间),将吸头沿器壁滑出容器,用吸水纸擦去吸头表面可能附着的液体,排液时吸头接触倾斜的器壁,先将按钮按到第一停点,停留一秒钟(粘性大的液体要加长停留时间),再按压到第二停点,吹出吸头尖部的剩余溶液,如果不便于用手取下吸头,可按下除吸头推杆,将吸头推入废物缸。
自动移液器(Eppendorf、Biohit以及IKA移液器)的使用注意事项是:
①吸取液体时一定要缓慢平稳地松开拇指,绝不允许突然松开,以防将溶液吸入过快而冲入移液器内腐蚀柱塞而造成漏气。
②为获得较高的精度,吸头需预先吸取一次样品溶液,然后再正式移液,因为吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时,吸头内壁会残留一层”液膜”,造成排液量偏小而产生误差。
③浓度和粘度大的液体,会产生误差,为消除其误差的补偿量,可由试验确定,补偿量可用调节旋钮改变读数窗的读数来进行设定。
④可用分析天平称量所取纯水的重量并进行计算的方法,来校正移液器,1mL 蒸馏水20℃时重0.9982g。
2025年9月10日,适逢BCEIA创办40周年,第二十一届北京分析测试学术报告会暨展览会(BCEIA2025)在北京·中国国际展览中心顺义馆盛大开幕。在本次盛会上,分析测试百科网在“巅峰对话”节目上......
......
又是人间四月天,樱花落尽柳絮黏;徜徉阡陌人未在,一池春水东流远。2023年ANTOP奖的申报和评审工作如火如荼的开展。由科尔帕默仪器(上海)有限公司申报的“移液器准确度快速鉴定”ANTOP奖,现在进入......
移液管和移液器?到底谁好谁准?1.移液器与移液管的对比(1)从使用的舒适性来说,移液器完胜于移液管。现在的手持式移液器,其外观设计中,已越来越多地掺入了人体工程学原理,使得移液器使用起来更为方便,更显......
一、移液器的使用方法1.设定移液体积:从大量程调节至小量程为正常调节方法,逆时针旋转刻度即可;从小量程调节至大量程时,应先调至超过设定体积刻度,再回调至设定体积,这样可以保证移液器的精确度。2.装配移......
分析测试百科网讯2020年11月16日-18日,慕尼黑上海分析生化展在上海新国际博览中心隆重召开。普兰德(上海)贸易有限公司携VACUU·PURE10C化学隔膜泵、PC3001VARIO变频化学隔膜真......
以时间铸就经典,用科技引领未来!在赛默飞移液产品走过的50年辉煌历程中,我们脚踏实地,砥砺前行,打造出一个又一个的第一支,助力液体处理和移液应用领域不断创新,代表移液新时代的ClipTip移液器更是让......
2020年春节,一场突如其来的疫情牵动着全国人民的心。在险峻的疫情面前,不仅全国各地的医护人员奔赴防疫一线,包括疾控、检测以及基层的社区工作者都纷纷投入这场没有硝烟的战“疫”中,上海安谱实验科技股份有......
中国科学技术大学工程科学学院微纳米工程研究室副教授李保庆与美国加州大学戴维斯分校教授潘挺睿合作,提出并实现了一种具有纳升级精度的液体移取技术。该技术结合普通移液器技术与微流控打印技术,利用微流控芯片可......
第六步,把活塞放入套柄中后装上套柄和吸头推出器——虽然一般破坏比建设容易,但我想一般能拆就能装吧。当然还有一个建议,在没有异常损坏的情况下,套柄一到两年换一次,以保证移液器的密封性。......