实验方法原理 | 低密度接种细胞,培养至集落形成,细胞染色(用于克隆形成率和存活检测 ) 或用于筛选时分离细胞、然后扩增为细胞株。 |
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实验材料 | CHO细胞 胰蛋白酶 |
仪器、耗材 | 培养基 吸管 培养皿 血细胞计数器 |
实验步骤 |
1. 细胞用胰蛋白酶(胰蛋白酶,0.25 %,1 :
250或相当活性)消化制备单细胞悬液。消化不充分会形成细胞团;过度消化会降低细胞活性。就克隆培养而言细胞呈单个悬浮状态是基础。如果是第一次克隆培养新的细胞系,有必要摸索一下消化时间和浓度,以确保能消化成单个悬浮细胞获得最佳克隆形成率。 展开 |
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