对照品溶液的制备 精密称取在105℃干燥至恒重的穿心莲内酯对照品 50mg。置50ml量瓶中，加60％乙醇适量，置水浴上微热使溶解，放冷．加60％乙醇至刻度，摇匀。精密吸取10ml，置50ml容量瓶中，加60％乙醇至刻度，摇匀，即得(每1ml中含穿心莲内酯 0.2mg)。
标准曲线的制备 精密量取对照品溶液l、2、3、4与5ml，分别置10ml量瓶中，各加60％乙醇至5ml，置20℃水浴中，加二硝基苯甲酸试液2ml，混匀，加0.2mol/L乙醇制氢氧化钾溶液2ml，摇匀，放置15分钟，加60％乙醇至刻度，摇匀。以相应的试剂作空白对照，照分光光度法(附录 Ⅴ B)，在540nm的波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
测定法 精密量取本品5ml置50ml量瓶中，用60％乙醇稀释至刻度，摇匀。精密量取2ml 置10ml量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“加60％乙醇至5ml”起。依法测定吸收度，从标准曲线上读出供试品溶液中穿心莲总内酯的含量，计算，即得。 本品每1ml含穿心莲总内酯以穿心莲内酯(C20H30O5)计，不得少于2.5mg。