第四代测序技术原理

　　以Oxford Nanopore Technologies为代表的纳米孔测序技术与其他测序技术不同的是，它基于电信号而不是光信号。经历了三个主要的技术革新：

一、单分子DNA从纳米孔通过；

二、纳米孔上的酶对于测序分子在单核苷酸精度的控制；

三、单核苷酸的测序精度控制。

　　将在某一面上含有一对电极的特殊脂质双分子层置于一个微孔之上，该双分子层中含有很多由α溶血素蛋白组成的纳米孔（直径2.6nm），只能容纳一个核苷酸通过，并且每个纳米孔会结合一个核酸外切酶。当DNA模板进入孔道时，孔道中的核酸外切酶会“抓住”DNA分子，顺序剪切掉穿过纳米孔道的DNA碱基，每一个碱基通过纳米孔时都会产生一个阻断，根据阻断电流的变化就能检测出相应碱基的种类，从而进行实时测序，最终得到DNA分子的序列。

　　Oxford Nanopore的特点是单分子测序，测序读长长（超过150kb），测序速度快，测序数据实时监控，机器方便携带等，但其单芯片测序成本还是在几百美金以上。

现有的四代测序技术还有哪些痛点

　　测序技术在不断进步中，进步的目的是要解决目前还没有完美答案的问题，比如四代测序在长读长、速度上已经大幅领先，那接下来首要的就是成本问题，无论是仪器成本，还是测序成本等，其它的次要因素还有数据通量、速度等。

　　是时候祭出这张经典的测序成本变化图，其含义再明显不过了：成本是技术广泛应用的决定性因素，这句话出自上周末国产四代测序厂商安序源的新品发布会，笔者深表赞同，毫无疑问，测序技术大规模商业化应用，就是成本因素在制约着。

　　带着好奇心，笔者认真的观看了他们的发布会，不由得被新颖的五边形的产品的吸引了： 低成本、长读长、高通量、速度快、精度高，每一个边都直击应用端的切实需求，如果性能都能达到，真机量产，那国货之光妥妥的。