1. 在3‘末端附近引入额外错配
2. 腺苷三磷酸双磷酸酶介导的等位基因特异PCR法(apyrase-mediated allelespecific extension, AMASE)
3. 焦磷酸解激活的聚合反应法(Pyrophosphorolysis-activated polymerization, PAP）
4. 改进酶效率
5. 锁定的核酸技术(locked Nucleic Acid, LNA)
