流式细胞术中所测得的量是相对值,因此需要在使用前或使用中对系统进行校准或标定,这样才能通过相对测量获得绝对的意义。因而FCM中的校准具有双重功能:仪器的准直调整和定量标度。 标准样品应该稳定,有形成份形状应是大小比较一致球形,样品分散性能良好,且经济、容易获得。常用标准荧光微球作为非生物学标准样品,鸡血 红细胞做为生物学标准样品。微球用 树脂材料制作,或标有 荧光素,或不标记荧光素。所用的鸡血 红细胞标准样品制作过程昭下:取3.8%枸橼酸或肝素抗凝的鸡血( 抗凝剂:鸡血=1:4),经PBS清洗3次,再用5~10ml的1.0% 戊二醛与清洗后的鸡红细胞混合,室温下振荡醛化24h,最后经PBS再清洗,贮4℃冰箱中备用。需要指出的是因为未经荧光染色,所测光信号为鸡 血红蛋白的自发荧光。