硫酸阿米卡星为半合成的氨基糖甙类抗生素，此类药物的作用机理主要是通过作用于蛋白质合成的过程而起作用。
体外试验和临床感染应用中均表明本品对以下大多数微生物有活性：
1、革兰氏阴性菌体外研究表明，阿米卡星有抗假单胞菌属、大肠杆菌、变形菌属(吲哚阴性和阳性)、普罗威登斯菌属、克雷白-肠杆菌属-沙雷菌属、不动杆菌属(Mima-Herellea)以及柠檬杆菌属活性。
2、当上述种属的微生物对其它氨基糖甙类药物(包括庆大霉素、妥布霉素和卡那霉素等)产生耐受性时，对于阿米卡星仍然很敏感。
3、革兰氏阳性菌-体外研究发现阿米卡星对产青霉素酶和非产青霉素酶的葡萄球菌属，包括甲氧西林耐受的种属都有活性。然而，氨基糖甙类药物一般对其它革兰氏阳性菌活性较低，即幽门链球菌属、肠球菌属以及肺炎链球菌属。
4、阿米卡星能够耐受那些降解其它氨基糖甙类药物(庆大霉素、妥布霉素和卡那霉素)的酶，不被降解。
5、体外试验显示，阿米卡星和β内酰胺类抗生素合用可协同拮抗临床上许多革兰氏阴性菌。