糖的测定方法——蒽铜的比色法

　　1.原理：糖与硫酸反应脱水生成羟甲基呋喃甲醛，生产物再与蒽铜缩合成兰色化合物，其颜色深浅与溶液中糖的浓

　　度成正比，可比色定量。

　　2.试剂

　　（1） 硫酸锌溶液：溶解500g化学纯硫酸锌于500ml水中

　　（2） 亚铁氰化钾溶液：溶解10.6g化学纯亚铁氰化钾于100ml水中

　　（3） 0.2％蒽铜试剂：溶解蒽铜0.2g于100ml95％硫酸中，置棕色瓶中冷暗处保存

　　（4） 0.1％葡萄糖液：准确称干燥葡萄糖0.1000g 定容100ml

　　3.操作方法

　　（1） 标准曲线绘制

　　（2） 100ml容量瓶编号

　　沸水浴加热6分钟，取出冷却→用1cm比色杯→610nm测定吸光度→作出以吸光度为横坐标，糖液浓度为纵坐标的准

　　曲线

　　（3）样品测定

　　称10g样品→于100ml热水加入500ml容量瓶中－加硫酸锌5ml→沸水浴5分钟→取出再摇动下加亚铁氰化钾5ml，→冷却→定容500ml→过滤→吸滤液25ml→于250ml容量瓶→定容250ml→取稀释液1ml，于比色管中→加10ml蒽铜试剂→摇匀→水浴加热6分钟→冷却→比色

　　试验注意

　　1，样液必须清澈透明，加热后不应有蛋白质沉淀

　　2，样品颜色较深时，可用活性炭脱色后再进行测定

　　3，此法与所用的硫酸浓度和加热时间有关

　　4，所取糖液浓度在1-2.5mg/100ml之间