紫外可见分光光度法测定食品中甜蜜素

用乙酸乙酯在酸性条件下提取食品中的甜蜜素,再以碱性水反提取,加入过量的次氯酸钠将甜蜜素转变为N,N-二氯环己胺,溶于环己烷\[4],在波长304nm处测定。
仪器和试剂： 754紫外分光光度计为上海第二光学仪器厂产品;乙酸乙酯、环己烷、10%(φ)硫酸、0.1mol/L氢氧化钠、20g/L次氯酸钠溶液(均为分析纯试剂);1.0g/L甜蜜素标准液,由国家标准物质研究中心提供,1999年1月定值。
标准曲线制作：分别吸取甜蜜素标准液0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL(相当于甜蜜素0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mg)于250mL分液漏斗中。各加入10%硫酸100mL,乙酸乙酯80mL振摇提取2min,弃水相。用30、20、20mL 0.1mol/L氢氧化钠溶液振摇提取3次,每次1min,合并水相于另一250mL分液漏斗中。往水相加入环己烷10mL振摇提取1min,弃去环己烷,加入10%硫酸15mL、环己烷10.0mL、20g/L次氯酸钠溶液5mL,振摇2min,再加入20g/L次氯酸钠溶液5mL,振摇2min,弃水相。先后用0.1mol/L氢氧化钠、蒸馏水各50mL洗涤环己烷层,经脱脂棉将环己烷滤于10mL比色管中,用环己烷调零,于波长304nm处测定吸光度。
样品测定：
1.液体食品称取相当含甜蜜素6.0mg样品(如含二氧化碳,先加热除去)于250mL分液漏斗中,以下同标准曲线方法测定。
2.可溶于水的固体称取相当含甜蜜素6.0mg样品加入适量的水溶解后,转入250mL分液漏斗中,以下同标准曲线方法测定。
3.不溶于水的固体称取适量经磨碎的固体于100mL容量瓶中,加水至刻度,不时摇匀,浸泡1h以上,取相当于甜蜜素6.0mg的滤液于250mL分液漏斗中,以下同标准曲线方法测定。