紫外可见分光光度计光度室的设计
大多数紫外可见分光光度计等光学类分析仪器都有一个根据使用需要而设计的光度室(又叫样品室)。光度室是使用者直接操作的地方。从单色器出来的单色光,一般是通过一个小透镜射到比色皿上,比色皿中的试样对单色光吸收一部分,透过一部分。其透过部分射到光电接收器上转变成电信号,再通过电子系统进行放大、处理,最后打印输出。
光度室一般由光度室盖、聚光透镜、比色皿、比色皿架、石英窗片等组成。
①光度室盖。光度室要求严防漏光,这取决于光度室盖。许多仪器制造商和使用者,往往不注意这个问题。有的仪器在光度室盖门的地方不密封,或者实验室房间的白光可进入光度室系统,所以测试结果因杂散光增大而导致误差增大。因此,光度室盖门的密封性很重要。使用者应经常检查光度室的密封性,严格做到光度室系统不漏光,以减少杂散光,保证分析测试结果的可靠性。
②聚光透镜。聚光透镜将从单色器射出的发散光变成平行光(有些仪器为聚光,但不符合比耳定律),再射到比色皿上。如果射到样品上,则要求单色器的出射狭缝处在聚光透镜的焦点上。聚光透镜要求消色差,否则不同波长的光不能聚在比色皿的中心。但有些普及型的紫外可见分光光度计仪器也有不用聚透镜的。有些要求不高的仪器为加强聚光能力,聚光透镜只是把从单色器射出的发散光直接聚在比色皿中央。
③比色皿。比色皿又称吸收池或样品池,是光度室的关键部件。我们在分析测试时,一般是同时利用两个分别盛有参比溶液和被测样品溶液的比色皿,对它们进行分别测试(双光束仪器同时测试),比较测试的吸光度(或透射比,一般都是比较吸光度)。因此,为了建立准确比较的基础,对比色皿的大小、形状及比色皿的两块透光面的平行度、光路长度、光谱特性等都应该进行匹配(配对)。即使是同一批次的同一规格的比色皿,其光路长度也不可能兔全相等,透光面的透光特性、几何尺寸、平行度等都可能有差异,因此需要挑选配对使用。
比色皿几何尺寸的误差会给测试结果带来很大的误差。由比色皿引起的分析误差可以根据比耳定律计算出来。
应该注意的一个重要问题是,在相对测量法中,如果随意调换参比比色皿与样品比色皿,比色皿的光程误差与配套误差是不可忽视的。特别是比色皿的配套误差,更应引起使用者的高度重视。
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